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酶標(biāo)聚合物法（labelled dextran polymer，LDP）法應(yīng)用了酶標(biāo)聚合物技術(shù)，如EnVision檢測(cè)系統(tǒng)，首先將辣根過(guò)氧化物酶或堿性磷酸酶標(biāo)記在葡聚糖聚合物上，然后再與第二抗體連接而形成EnVision二抗。
LDP法屬于二步法，特異性一抗和組織細(xì)胞抗原結(jié)合后，再用EnVision二抗與抗原抗體復(fù)合物中的一抗結(jié)合，最后通過(guò)EnVision二抗上的酶參與顯色反應(yīng)。
由于EnVision二抗中的聚合物結(jié)構(gòu)的*，可以連接更多的二抗，使每個(gè)多聚物有超過(guò)20個(gè)位點(diǎn)與di一抗體結(jié)合，聚合物上能標(biāo)記上的酶數(shù)量較多。因此在顯色時(shí)有充足的酶與顯色劑起反應(yīng)。
因此LDP法的敏感性高于ABC、LSAB等方法。此外，LDP法中的第二抗體沒(méi)有生物素的存在，不會(huì)出現(xiàn)ABC、LSAB等方法中含有的生物素與組織中內(nèi)源性生物素起交叉反應(yīng)的現(xiàn)象，因此LDP法的非特異性背景染色極低。
增強(qiáng)聚合物一步法（enhanced polymer one setp，EPOS）法也屬于酶標(biāo)聚合物法，和LDP法一樣，是利用酶標(biāo)聚合物技術(shù)，將辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記在葡聚糖聚合物上，然后再與di一抗體連接而形成EPOS一抗。
EPOS法屬于直接法，直接用EPOS一抗特異性和組織細(xì)胞抗原結(jié)合后，一抗上的酶參與顯色反應(yīng)。由于EPOS一抗中的聚合物上能標(biāo)記上的酶數(shù)量較多，在顯色時(shí)有充足的酶與顯色劑起反應(yīng)。因此EPOS法雖然是直接法，但具有高敏感性。
此外，EPOS一抗沒(méi)有生物素的存在，不會(huì)出現(xiàn)ABC、LSAB等方法中含有的生物素與組織中內(nèi)源性生物素起交叉反應(yīng)的現(xiàn)象，背景清晰。但EPOS一抗種類(lèi)較少，難以普及。
催化信號(hào)放大（catlyzed signal amplification，CSA）法是應(yīng)用一種放大試劑生物素化酪胺，與抗生物素蛋白鏈菌素-生物素-過(guò)氧化物酶復(fù)合物（streptavidin biotin-HRP）連接，在過(guò)氧化物酶作用下形成大量的生物素沉積物，再加入抗生物素蛋白鏈菌素-過(guò)氧化物酶復(fù)合物后，過(guò)氧化物酶與生物素沉積物形成大量的過(guò)氧化物酶聚合，聚合的過(guò)氧化物酶與顯色劑起反應(yīng)。在第三步應(yīng)用了SABC法的SABC-HRP復(fù)合物，第五步應(yīng)用了LSAB法的SA-HRP復(fù)合物。
由于CSA法加入了催化信號(hào)放大試劑，使信號(hào)不斷放大，因此敏感性比EPOS一步法、EnVision二步法、PAP/APPAP法、LSAB（S-P）法和SABC等方法高。特別適用于檢測(cè)較弱的組織抗原。
以上就是后四種常用的免疫組織化學(xué)染色方法的簡(jiǎn)介。如在實(shí)驗(yàn)中遇到困難，也可以選擇Leica全自動(dòng)免疫組化染色儀來(lái)協(xié)助您。
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