有多種因素可能導致這種情況：
1. 二氧化碳濃度不正確:檢查設(shè)置以確保 CO2 水平設(shè)置為適合您的細胞系的水平（通常在 5% 到 10% 之間）；經(jīng)常檢查線路連接是否有泄漏，避免頻繁打開和關(guān)閉培養(yǎng)箱門。
2. 培養(yǎng)箱中的溫度波動：使用一個好用的溫度計在培養(yǎng)箱內(nèi)部監(jiān)測溫度。
3. 兩性霉素B或其他預防性抗生素/抗真菌藥物的濃度有毒：按照推薦的濃度使用。
4. 培養(yǎng)箱濕度不正確：檢查水盤中的水位，濕度對于許多細胞和培養(yǎng)基而言至關(guān)重要，通常我們需要保證培養(yǎng)箱時刻有水，也就是飽和濕度。
5. 培養(yǎng)基的滲透壓不正確：大多數(shù)哺乳動物細胞可以耐受 260 至 350 mOsm/kg 的滲透壓，過量添加某些試劑和藥物可能會影響滲透壓。
6. 微生物污染：細菌和真菌污染通常很容易看到；支原體污染的癥狀比較難辨別，需要仔細監(jiān)測細胞形態(tài)并定期進行檢測以及早發(fā)現(xiàn)污染。
7. 使用了不適當?shù)呐囵B(yǎng)基：確認所使用的培養(yǎng)基適用于您的細胞類型；需確認是否含有血清及必須營養(yǎng)成份、是否缺少某些微量元素成份、是否含有其他添加劑及藥物、培養(yǎng)基是否過效期、培養(yǎng)基保存方式是否得當。
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