狠狠色丁香久久综合婷婷亚洲成人福利在线-欧美日韩在线观看免费-国产99久久久久久免费看-国产欧美在线一区二区三区-欧美精品一区二区三区免费观看-国内精品99亚洲免费高清

            深圳市安培生物科技有限公司
            中級(jí)會(huì)員 | 第5年

            19126518388

            血清系列
            細(xì)胞轉(zhuǎn)染
            支原體清除
            細(xì)胞凍存
            實(shí)驗(yàn)耗材
            分子試劑
            細(xì)胞增殖與凋亡
            Biozellen系列
            培養(yǎng)基
            ELISA試劑盒
            TOYOBO(東洋紡)
            ZYMO RESEARCH
            Greiner(格瑞納)
            IKA(艾卡)
            化學(xué)發(fā)光底物(ECL)
            PROSPEC系列
            Epigentek系列
            微生物檢測(cè)
            細(xì)胞生物學(xué)
            Corning康寧
            解離試劑
            細(xì)胞類(lèi)-實(shí)驗(yàn)耗材
            原代細(xì)胞
            植物檢測(cè)系列試劑盒
            SERANA
            BSA
            細(xì)胞系
            生化試劑盒
            環(huán)境檢測(cè)系列試劑盒(AKEN)
            類(lèi)器官培養(yǎng)
            緩沖器和解決方案
            生物三凝膠基質(zhì)
            細(xì)胞因子分子
            生物樣本庫(kù)
            蛋白研究系列

            細(xì)胞不長(zhǎng),這些方面您注意了嗎?

            時(shí)間:2021/10/25閱讀:1657
            分享:

            Q1

            培養(yǎng)液pH對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響?

            答:由于大多數(shù)細(xì)胞適宜pH為7.2-7.4,偏離此范圍可能對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)將產(chǎn)生有害的影響,目前也有些無(wú)血清培養(yǎng)基或者轉(zhuǎn)染用的培養(yǎng)基PH值會(huì)在6.5左右。因?yàn)楦鞣N細(xì)胞對(duì)pH的要求也不*相同,原代培養(yǎng)細(xì)胞一般對(duì)pH變動(dòng)耐受差,無(wú)限細(xì)胞系耐受力強(qiáng)。但總體來(lái)說(shuō),細(xì)胞耐酸性比耐堿性強(qiáng)一些。在配制培養(yǎng)用液時(shí),需要注意一點(diǎn):培新配的培養(yǎng)基在經(jīng)過(guò)0.10um或0.22um濾膜過(guò)濾時(shí),溶液的pH還會(huì)向上浮動(dòng)0.2左右


            Q2

            培養(yǎng)液pH下降很快可能原因有哪些?其解決方法是什么?


            答:通常細(xì)胞生長(zhǎng)得非常快時(shí),pH值通常下降得很快。此時(shí)可以及時(shí)傳代、提高傳代比例或降低血清量等方法進(jìn)行解決。此外,培養(yǎng)瓶蓋擰得太緊、NaHCO3緩沖系統(tǒng)緩沖能力不夠、培養(yǎng)液中鹽濃度不正確、細(xì)菌、酵母或真菌污染等也能導(dǎo)致pH值通常下降得很快。

                (1)按培養(yǎng)液中NaHCO3濃度增加或減少培養(yǎng)箱內(nèi)CO2濃度,2.0g/L到3.7g/L濃度NaHCO3對(duì)應(yīng)CO2濃度為5%到10%。

                (2)改用不依賴(lài)CO2培養(yǎng)液。

                (3)松開(kāi)瓶蓋1/4圈。加HEPES緩沖液至10到25mM終濃度。

                (4)在CO2培養(yǎng)環(huán)境中改用基于Earle′s鹽配制的培養(yǎng)液,在大氣培養(yǎng)環(huán)境中培養(yǎng)改用Hanks鹽配制的培養(yǎng)液。

                (5)如果是污染造成的則丟棄培養(yǎng)物或用抗生素除菌。


            Q3

            培養(yǎng)基中丙酮酸鈉的作用是什么?



            答:丙酮酸鈉可以作為細(xì)胞培養(yǎng)中的替代碳源,盡管細(xì)胞更傾向于以葡萄糖作為碳源,但是,如果沒(méi)有葡萄糖的話(huà),細(xì)胞也可以代謝丙酮酸鈉。

            Q4

            Hank′s平衡鹽溶液(HBS)和Earle′s平衡鹽溶液(EBS)有什么本質(zhì)的功能差別?


            答:HBS和EBS的主要差別在于碳酸氫鈉的水平,在Eagle′s(2.2g/L)中比在Hanks′(0.35g/L) 中高。碳酸氫鈉需用高水平的CO2平衡,以維持溶液的PH值。Eagle′s液在空氣水平的CO2中,溶液會(huì)變堿,Hanks′液在CO2培養(yǎng)箱中會(huì)變酸。如果希望在CO2培養(yǎng)箱中保存組織,需要用Eagle′s液,。如果僅僅是清洗將要在細(xì)胞培養(yǎng)基中儲(chǔ)存的組織,用Hanks′液就可以了。


            Q5

            培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)應(yīng)使用5%還是10%CO2,或者根本沒(méi)有影響?



            答:一般培養(yǎng)基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作為pH的緩沖系統(tǒng),而培養(yǎng)基中NaHCO3的含量將決定細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)應(yīng)使用的CO2濃度。當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3含量為每公升3.7g時(shí),細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)應(yīng)使用10%CO2;當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3為每公升1.5g時(shí),則應(yīng)使用5%CO2培養(yǎng)細(xì)胞。


            Q6

            培養(yǎng)細(xì)胞出現(xiàn)死亡其可能的原因有什么?解決辦法有哪些?



            答:可能的原因有培養(yǎng)箱內(nèi)無(wú)CO2;培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大;細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過(guò)程中損傷;培養(yǎng)液滲透壓不正確;培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積等。

                 解決辦法可以檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2濃度,檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度;取新的保存細(xì)胞種;檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓,換入新鮮培養(yǎng)液等。


            會(huì)員登錄

            ×

            請(qǐng)輸入賬號(hào)

            請(qǐng)輸入密碼

            =

            請(qǐng)輸驗(yàn)證碼

            收藏該商鋪

            X
            該信息已收藏!
            標(biāo)簽:
            保存成功

            (空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)

            常用:

            提示

            X
            您的留言已提交成功!我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~
            撥打電話(huà)
            在線(xiàn)留言