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            深圳市安培生物科技有限公司
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            Calcein釋放實驗檢測細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞活性實驗方法

            時間:2021/11/12閱讀:1768
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            實驗步驟


            1. 靶細(xì)胞的標(biāo)記 
            用5μmol/L Calcein AM 37℃ 水浴30min進行標(biāo)記。
             
            2. 效-靶細(xì)胞作用 
            殺傷實驗在圓底96孔培養(yǎng)板中進行。按E/T比例:50/1、25/1、12.5/1、6.25/1、3.13/1、1.56/1加入梯度稀釋的效應(yīng)細(xì)胞與標(biāo)記好的靶細(xì)胞各l00μl/孔,每個比例3復(fù)孔。同時設(shè)自發(fā)釋放組3復(fù)孔,*釋放組3復(fù)孔。效-靶細(xì)胞作用96孔培養(yǎng)板在37℃ 5% CO2培養(yǎng)箱孵育4h后,3000r/min離心5min,將上清移入新的孔中。
             
            3. 熒光檢測 
            用熒光測量儀檢測上清的熒光值(FI),激發(fā)光為485nm,發(fā)射光為538nm。
             
            4. 結(jié)果計算
            殺傷率(%)=■×100%



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