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            深圳市安培生物科技有限公司
            中級(jí)會(huì)員 | 第5年

            19126518388

            血清系列
            細(xì)胞轉(zhuǎn)染
            支原體清除
            細(xì)胞凍存
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            細(xì)胞系
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            生物三凝膠基質(zhì)
            細(xì)胞因子分子
            生物樣本庫(kù)
            蛋白研究系列

            大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)——貼塊法

            時(shí)間:2021/12/4閱讀:1388
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            材料與儀器

            SD大鼠
            PBS FBS DMEM
            手術(shù)剪 手術(shù)鉗 眼科剪刀 眼科鑷子 大頭針 手術(shù)刀 培養(yǎng)皿

            步驟

            一、實(shí)驗(yàn)步驟

            1. SD 大鼠(150-200 g),斷頭,浸入75%的酒精中15 min。

            2. 置入超凈臺(tái)中,將大鼠固定于殺鼠板上,在無(wú)菌條件下打開(kāi)腹腔,分離出胸主動(dòng)脈、腹主動(dòng)脈, 摘出。

            3. PBS 清洗3 遍,剝?nèi)ネ饽?,用手術(shù)刀片刮去內(nèi)膜,留下中膜并將其移入1 mL 的培基中、剪成1x1 mm2 大小組織塊。

            4. 再將PBS清洗組織塊,移入25 mL 的培養(yǎng)瓶中,用尖嘴彎管均勻貼好組織塊,放入37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱倒置培養(yǎng)6 小時(shí)后,待組織塊貼壁后,再加入2.5 mL 培養(yǎng)液后放回培養(yǎng)箱中。

            5. 隨后每3 天予以全量換液。

            二、結(jié)果

            3-5 天后可見(jiàn)組織塊周圍有細(xì)胞爬出,大約2 周后80-90%融合。


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