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            深圳市安培生物科技有限公司
            中級(jí)會(huì)員 | 第5年

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            細(xì)胞中液泡系活體染色

            時(shí)間:2023/1/12閱讀:2256
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            簡(jiǎn)介

            細(xì)胞中液泡系活體染色實(shí)驗(yàn)是利用中性紅(neutrol red)是液泡系的專一性活體染色劑的特性,在細(xì)胞處于生活狀態(tài)時(shí),只將液泡系染成紅色,細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核不被染色。

            原理

            細(xì)胞中液泡系活體染色實(shí)驗(yàn)的基本原理是動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)由單層膜包裹的小泡都屬于液泡系,包括高爾基復(fù)合體、溶酶體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、轉(zhuǎn)運(yùn)泡、吞噬泡等。軟骨細(xì)胞內(nèi)含有較多的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達(dá)的高爾基復(fù)合體,能合成與分泌軟骨黏蛋白及膠原纖維等,因而液泡系發(fā)達(dá)。中性紅(neutrol red)是液泡系的專一性活體染色劑,在細(xì)胞處于生活狀態(tài)時(shí),只將液泡系染成紅色,細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核不被染色。

            材料與儀器

            器材:
            解剖器材、蠟盤、載玻片、蓋片、吸管、吸水濾紙、普通光學(xué)顯微鏡、蟾蜍。
            試劑:

            ① 1/3000 中性紅;

            ② 0.65% Ringer 液(兩棲動(dòng)物用)(氯化鈉,0.65 g;氯-化-鉀,0.042 g;氯化鈣,0.025 g;蒸餾水,100 ml。)

            步驟

            細(xì)胞中液泡系活體染色實(shí)驗(yàn)的基本過程可分為如下幾步:
            A 取蟾蜍 1 只,搗毀脊髓法處死,將其腹面朝上固定于蠟盤上,剪開腹腔,取胸骨劍突軟骨最薄部分的一小片,置于載片上。
            B 滴加 1/3000 中性紅,染色 15 min。
            C 濾紙吸去染液。
            D 滴加 0.65% Ringer 液,蓋上蓋片,用濾紙從蓋片側(cè)面吸取多余液體。
            E 鏡下觀察。

            注意事項(xiàng)

            1 為便于觀察,在取胸骨劍突時(shí),盡量取較薄部位。

            2 本實(shí)驗(yàn)因是活體染色,在實(shí)驗(yàn)的整個(gè)過程中,應(yīng)注意保持標(biāo)本的活體狀態(tài),特別在取材時(shí)應(yīng)做到準(zhǔn)確、快速。


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