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            如何選擇合適的內(nèi)參抗體?

            時間:2021/9/16閱讀:3322
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            如何選擇合適的內(nèi)參抗體?


            Tips:在選擇內(nèi)參抗體時,我們需要遵循幾個原則:

            1.種屬來源
            哺乳動物的樣本需要選擇哺乳動物中穩(wěn)定表達的蛋白作為內(nèi)參,同樣的,植物樣本需要選擇植物中穩(wěn)定表達的蛋白作為內(nèi)參。


            2. 細胞定位
            靶標蛋白的細胞定位不同,適合的內(nèi)參也不同。如全細胞裂解液可選擇beta-actin、beta-tubulin等,膜蛋白一般選擇Na K ATPase,核蛋白則選擇Lamin B1、Histone H3等。

            內(nèi)參.png

            3. 分子量
            內(nèi)參蛋白的分子量需要與目標蛋白的分子量有所區(qū)別,否則兩者條帶無法分開。一般目的蛋白與內(nèi)參蛋白大小至少相差5K Da以上。


            4. 表達因素
            內(nèi)參選擇還需要考慮實際的實驗環(huán)境。GAPDH是代謝類蛋白,在活組織中表達較穩(wěn)定。beta-actin和beta-tubulin是結(jié)構(gòu)蛋白,不同組織的細胞結(jié)構(gòu)會有差異性。


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            beta-actin兔多克隆抗體
            GAPDH小鼠單克隆抗體
            PCNA小鼠單克隆抗體(1D7)
            植物actin小鼠單克隆抗體(3T3)

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