狠狠色丁香久久综合婷婷亚洲成人福利在线-欧美日韩在线观看免费-国产99久久久久久免费看-国产欧美在线一区二区三区-欧美精品一区二区三区免费观看-国内精品99亚洲免费高清

      

        

            










            
		
	
            

            
	    						                                                                                                                		                                             		
        
            廣州市艾貝泰生物科技有限公司
            
		
		
            
			
		
		
            
	
            



            
    	
    	
            
		
		
            
			TECHNOLOGY
			
            當前位置：廣州市艾貝泰生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>基因與細胞治療領(lǐng)域的病毒載體生產(chǎn)用細胞株的開發(fā)
            
		
            
	
            

            

            
	
            
		
            
			
            基因與細胞治療領(lǐng)域的病毒載體生產(chǎn)用細胞株的開發(fā)
            
			
            
				時間：2022-5-26
				閱讀：726
				
            
							
				
				分享：
				
				
						
            			
            
				
            
					 
            基因治療被認為是許多嚴重的和危及生命的疾病有效的治療手段，得到越來越多人的關(guān)注。同時，基因治療的適應(yīng)癥正從罕見/極罕見疾病向更常見疾病發(fā)生轉(zhuǎn)變，患者數(shù)量和綜合療法越來越多。因而，大規(guī)模的基因治療病毒載體生產(chǎn)是行業(yè)的迫切需求。
             

            2020年，F(xiàn)DA更新了關(guān)于基因治療臨床試驗申請(INDs)的化學(xué)、制造和控制指導(dǎo)原則，內(nèi)容包含穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株開發(fā)及細胞克隆性確證等。文件指出，細胞庫（Cell bank）的穩(wěn)定性及純度是一個需要考慮的重要方面。非單克隆來源的細胞群中，其細胞異質(zhì)性相對較高，產(chǎn)量低的細胞系往往與高產(chǎn)細胞群體競爭，導(dǎo)致高產(chǎn)細胞個體占比越來越少，最終隨著傳代次數(shù)的增加，導(dǎo)致細胞庫或工作庫的質(zhì)量下降，因此，通過單克隆細胞篩選是提高病毒載體產(chǎn)量及質(zhì)量的重要步驟。單克隆源性的確證是一種控制細胞種群降低其異質(zhì)性的方法，通過防止異種細胞群體的產(chǎn)生，來保障未來生產(chǎn)出的病毒產(chǎn)品的質(zhì)量不受影響。

            CEVEC公司（CEVEC Pharmaceuticals）針對 ELEVECTA® AAV包裝細胞系的研究數(shù)據(jù)顯示，通過單克隆篩選出的細胞株其AAV產(chǎn)量要比非單克隆細胞來源的高10倍左右。

            張瑰宜博士在“生物藥生產(chǎn)用細胞株構(gòu)建和篩選策略”研討會上分享了她們使用Cytena 的單細胞打印機SCP的感受，其噴墨式打印技術(shù)溫和而高效的分選單細胞，簡化篩選工作流程，大大提高了單克隆有效率，獲得了穩(wěn)定性高及一致性好的單克隆，用于后續(xù)的AAV生產(chǎn)，大大的提高了AAV產(chǎn)量。

            圖片
            克隆HEK293細胞的記錄

            圖片
            HEK293單克隆細胞提高AAV產(chǎn)量


            掃碼觀看直播回放
            生物藥生產(chǎn)用細胞株構(gòu)建和篩選策略
             
            圖片
             

            英國著名的葛蘭素史克（GlaxoSmithKline，GSK）藥物研究中心報告了一種如何快速獲得穩(wěn)轉(zhuǎn)的293T細胞，生成慢病毒載體的方法：將編碼所有慢病毒載體成分的單個 DNA 結(jié)構(gòu)體穩(wěn)轉(zhuǎn)入293T細胞，單細胞打印機進行單克隆篩選，獲取遺傳學(xué)和功能穩(wěn)定的適應(yīng)懸浮培養(yǎng)的生產(chǎn)用293細胞系。由此產(chǎn)生的懸浮細胞系可生產(chǎn)出與瞬時轉(zhuǎn)染一樣高滴度的病毒，可以在一次性攪拌罐生物反應(yīng)器中輕松放大，并且在后續(xù)細胞培養(yǎng)中遺傳和功能穩(wěn)定。此方法將降低慢病毒載體的大規(guī)模生產(chǎn)成本，提升慢病毒載體在細胞治療中的應(yīng)用價值。（Chen Y H , Pallant C , Sampson C J , et al. Rapid lentiviral vector producer cell line generation using a single DNA construct[J]. Molecular Therapy — Methods & Clinical Development, 2020.）

            在基因編輯領(lǐng)域，Stephan Riesenberg等學(xué)者進行細胞克隆基因型和靶基因拷貝數(shù)分析時使用 Cas9 核糖核蛋白和 DNA 供體電穿孔在 FRMD7 基因中編輯 409-B2 hiPSC，分別用（不用）2 M M3814 處理細胞 3 天后使用單細胞打印機(Cytena)對細胞進行單克隆化用于后續(xù)分析。文章中HEK293 和 K562 細胞的單克隆化也是通過使用單細胞打印機分選單細胞來獲得的。（Stephan R ,  Manjusha C ,  Dominik M , et al. Simultaneous precise editing of multiple genes in human cells[J]. Nuclc Acids Research, 2019(19):19.）

            Gross等采用f.sight™單細胞打印機，通過GFP報告基因，用于選擇和克隆CRISPR/Cas9編輯以敲除RANKL蛋白的間充質(zhì)干細胞(MSC)，以進一步增強MSCs在再生醫(yī)學(xué)中的治療能力。
            圖片



            分割線


             
             

            參考資料

            [1] 提升高產(chǎn)細胞株篩選效率，助力基因治療、抗體藥物等工藝開發(fā)——單細胞打印機（附案例分享）

            [2] 簡化CRISPR基因編輯的干細胞的工作流程，提高單克隆效率
             
             
            艾貝泰作為Cytena中國代理，公眾號（Applitech）中多個軟文詳細介紹Cytena單細胞打印機篩選原理、功能更新、應(yīng)用文獻以及案例分享等，掃碼關(guān)注公眾號，不間斷更新關(guān)于Cytena單細胞打印機以及其他代理品牌信息。
             
            圖片
            掃碼關(guān)注了解更多信息???
             
            
				
            
				
		
            
	
            

            


        
        




    

    

    

	 
    
    				
			 
    
    

    

     
      
     
	 

 		 


            
	
            
		
            
			
            會員登錄
            
			×
		
            
		
            
				
            
					
            
						
						
            請輸入賬號
            
					
            
				
            
				
            
					
            
						
						
            請輸入密碼
            
					
            
				
            
				
            
					
            =
                       
            請輸驗證碼
            
                    
            
				
            
				
            
		
            
	
            

            


            
	
            
		
            
			
            收藏該商鋪
            
			X
		
            
		
            
			
			
            該信息已收藏！
            
			
			
            
                
            
                    
            標簽：
            
                    
            保存成功
            (空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)
            
                
            
                
            
                    
            常用：
            
                    
            
                
            
            
            
		
            
	
            

            


            
	
            
		
            
			
            提示
            
			X
		
            
		
            
			
            您的留言已提交成功！我們將在第一時間回復(fù)您~
            
		
            
	
            

            










            
    撥打電話
    產(chǎn)品分類

            
        
		
		
		
		
		
		
		
		


    

	
            
		在線留言