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分離純化領(lǐng)域之大變革-徑向?qū)游龅臅r(shí)代來臨了
什么是徑向?qū)游黾夹g(shù)？
傳統(tǒng)的軸向流層析技術(shù)中，其流體在柱內(nèi)從一端流向另一端，通常是柱上端往下端流動(dòng)，液流方向沿著中軸重力方向向下流動(dòng)。
而徑向?qū)游黾夹g(shù)不同于傳統(tǒng)的軸向流層析技術(shù)，徑向流色譜柱流動(dòng)相攜帶樣品沿徑向遷移。徑向?qū)游鲋O(shè)計(jì)成了套筒狀，即填料形狀不是傳統(tǒng)的柱狀，而是類似于甜甜圈的形狀，層析柱包含內(nèi)外表面，中間通道裝載填料。軸向與徑向?qū)游鲆毫髁髀啡缦滤荆?br style="box-sizing: border-box; margin: 0px; padding: 0px; font-family: " pingfang="" microsoft="" font-size:="" line-height:="" font-weight:="" font-style:="" vertical-align:="" background:="" -webkit-tap-highlight-color:="" appearance:=""/>
通常，徑向?qū)酉抵辛鲃?dòng)相從柱頂部進(jìn)入，后通過管路分散至外擋板，后垂直與中軸徑向往內(nèi)擋板流動(dòng)，填料即裝載與內(nèi)外擋板之間，如下圖所示：
徑向?qū)游黾夹g(shù)有什么優(yōu)勢(shì)
>>>>優(yōu)勢(shì)1：反壓更低、保護(hù)填料，增加填料利用率
分別使用2種填料以相同流速測(cè)試傳統(tǒng)軸向工藝(Axial)和徑向工藝(Radial)的系統(tǒng)反壓, 對(duì)比列表如下：
表中可見，相同流速徑向工藝大幅降低系統(tǒng)反壓，有效防止過高壓力壓碎填料，尤其是使用軟膠工藝的產(chǎn)品，有效提升填料使用次數(shù)，提高使用率。
>>>>優(yōu)勢(shì)2：更快，時(shí)間成本節(jié)省4倍以上
下表為徑向工藝和傳統(tǒng)軸向工藝疏水層析柱分離蛋白比對(duì)
Courtesy：University of Nebraska
表中可見，傳統(tǒng)軸向工藝層析時(shí)間是徑向工藝的18倍。
特別是在生物制品原液中試及生產(chǎn)領(lǐng)域，徑向?qū)游龉に嚹軌虼蟠罂s短工藝時(shí)間，提升層析效率，降低時(shí)間成本。
另外，徑向?qū)游鲋軌蛴行Ы档推胶馑璧木彌_液體積，節(jié)省試劑成本及平衡時(shí)間，對(duì)比數(shù)據(jù)如下：
>>>>優(yōu)勢(shì)3：柱效更好、分辨率更高
使用相同體積填料的徑向柱及軸向柱分離相同的卵轉(zhuǎn)鐵蛋白與牛血清白蛋白的混合物，峰型及對(duì)比數(shù)據(jù)如下：
圖中可見，由于徑向?qū)游龅慕Y(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)，相比于傳統(tǒng)軸向柱呈現(xiàn)出更好的柱效及分辨率，有利于難分離的蛋白質(zhì)的分離純化。對(duì)稱性As對(duì)比數(shù)據(jù)如下：
塔板數(shù)對(duì)比數(shù)據(jù)如下：
圖中可見，徑向工藝裝柱塔板數(shù)顯著高于軸向柱，為更好的分離純化效果提供了有利的支持。
>>>>優(yōu)勢(shì)4：防止蛋白柱上降解及沉淀，提高收率
層析工藝中樣品通常富集在層析柱頂部，濃度呈現(xiàn)水滴狀分布，靠近頂部出液口的填料負(fù)載較高的樣品濃度，進(jìn)而向周圍擴(kuò)散，層析柱底部濃度低，尤其是未滿載上樣時(shí)。
對(duì)于某些疏水性較強(qiáng)樣品，其穩(wěn)定性受柱上富集樣品濃度影響較大，較高的濃度通常導(dǎo)致柱上富集沉淀，進(jìn)而收率降低。而Superflo柱(徑向工藝)層析柱頂部出液口不只一處，而是若干出口均勻分布于上表面，產(chǎn)生均勻的頂部樣品分布，另外徑向工藝層析柱的上表面積顯著大于下表面積，進(jìn)一步降低了樣品富集后的柱上濃度，更有利于樣品穩(wěn)定，產(chǎn)生高收率。
另外，由于徑向工藝快速的線性流速及更短的層析時(shí)間，降低了樣品柱上降解的可能性，針對(duì)于易于降解的樣品有利于快速收獲后進(jìn)一步防降解處理。
徑向?qū)游黾夹g(shù)之問
01 徑向?qū)游鲋绾螌?shí)現(xiàn)反壓更低、流速更快，層析時(shí)間節(jié)??？
答：生物制品工藝中傳統(tǒng)軸向柱的裝柱高度在20cm左右，個(gè)別廠商甚至達(dá)到30cm,較高的裝柱高度帶來較大的反壓，限制層析流速提升，層析時(shí)間較長(zhǎng)，而Superflo柱(徑向工藝)中試裝柱高度低至5cm,生產(chǎn)級(jí)別高度低至10cm,另外填料上表面積大于下表面積，從而帶來更低的反壓及更高的層析效率。
02 徑向?qū)游鍪褂酶缶€性流速是否會(huì)降低樣品載量及收率？
答：徑向色譜中高達(dá)0.5CV/min線性流速、保留時(shí)間低至2min依然保持90%以上的回收率，徑向?qū)游霾粫?huì)降低樣品載量及收率，甚至客戶還可進(jìn)一步提升線性速度追求高效率。
03 徑向?qū)游鲋绾我子诜糯笄曳糯蠛笳嫉馗。?/span>
答：Superflo柱(徑向工藝)的放大依然遵循線性放大原則，床深不變，只需要增加縱向高度，放大后仍然是修長(zhǎng)柱狀，而非傳統(tǒng)柱的矮胖狀。
04 徑向?qū)游鲋绾螌?shí)現(xiàn)無需拆卸即可進(jìn)行填料安裝和卸除？
答：無需拆開柱子，只需要使用蠕動(dòng)泵配合壓力表填裝填料漿液和拆除沖洗即可完成填料拆裝。
徑向?qū)游黾夹g(shù)全工藝解決方案供應(yīng)商
廣州市艾貝泰生物科技有限公司立足于生物工藝的優(yōu)化、放大及生產(chǎn)，除了為國(guó)內(nèi)客戶提供高品質(zhì)的Applikon生物反應(yīng)器，還引進(jìn)了產(chǎn)品，如Nova生化分析儀、Cytena克隆篩選單細(xì)胞打印機(jī)系統(tǒng)、Kaiser拉曼在線生物工藝分析儀、Flownamics在線取樣器、Sepragen徑向?qū)游鱿到y(tǒng)、Constant Systems高壓細(xì)胞破碎儀等。為滿足生物制藥行業(yè)高速發(fā)展的需要，艾貝泰也專業(yè)研發(fā)和生產(chǎn)一次性使用的生物工藝設(shè)備和耗材。艾貝泰不斷完善生物制藥領(lǐng)域的產(chǎn)品線，為用戶提供多方位的專業(yè)產(chǎn)品解決方案。