在現(xiàn)代生物制藥的世界里，活性藥物成分（API）的制造就像烹飪大餐，上游工藝（USP）是食材準(zhǔn)備階段，下游工藝（DSP）就是大廚的烹飪過程。

先來看看上游工藝（USP）。我們精心挑選最好的“細(xì)胞種子”，進行細(xì)致的發(fā)酵培養(yǎng)。這些細(xì)胞會在適合的條件下快樂成長，生產(chǎn)出所需的生物分子。這就是我們的原料，之后就由下游工藝（DSP）來完成精彩的烹飪過程。

下游工藝（DSP）就像是位大廚，他要做的就是將上游工藝（USP）提供的原料進行精心的烹飪。細(xì)胞與溶液的分離就像是清理食材，去蕪存菁。然后根據(jù)電荷、大小、疏水性或親和力等特性，將所需的 API 從細(xì)胞中釋放出來。這個過程就像是將各種食材巧妙地融合在一起，形成一道美味的大餐。

整個過程就像廚師需要關(guān)注菜品的味道一樣，我們還需要密切監(jiān)測副產(chǎn)物、細(xì)胞生長培養(yǎng)基的特性以及后續(xù)純化和加工步驟中的產(chǎn)品質(zhì)量。同時還要監(jiān)測關(guān)鍵質(zhì)量屬性（CQAs）和關(guān)鍵工藝參數(shù)（CPPs），讓每一個步驟都完美無瑕。

因為生物產(chǎn)物是如此復(fù)雜，我們不能僅僅依靠經(jīng)驗，還需要借助靈敏的分析工具（例如 UHPLC）來提供準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)，幫助我們精確控制每一個步驟，確保一切都恰到好處。

在下游工藝中，我們巧妙地運用在線 LC 來“把關(guān)”，監(jiān)測 mAb 純化工藝中高分子量聚集體的百分比（%HMWs mAb 聚集體），確保經(jīng)過 AEX 色譜精處理步驟的洗脫液的產(chǎn)品質(zhì)量。我們采用了符合 GMP 要求的無菌 FPLC 解決方案，而配備 NovaSeptum 取樣接頭的 Agilent 1260 Infinity II Prime 在線液相色譜系統(tǒng)，就像一個守門員，緊緊盯著來自純化系統(tǒng)的“出口”，完成以下動作：

為了應(yīng)對可能出現(xiàn)的“色譜柱故障”，我們還準(zhǔn)備了一臺額外的泵和柱切換閥，像替補隊員一樣隨時待命。當(dāng)色譜柱“體力不支”時，它們可以立即“替補上場”，確保生產(chǎn)流程的順利進行。

每 4 分鐘我們就能得到一份“體檢報告”，上面清楚地顯示了所需 mAb 的濃度和高分子量聚集體的百分比信息，用來輕松判斷產(chǎn)品的質(zhì)量是否符合預(yù)期。報告的關(guān)鍵信息通過 OPC UA 傳遞給上級過程控制系統(tǒng) PCS（工藝流程控制的大腦），由 PCS 來決定整個純化過程的節(jié)奏。4 分鐘一次的結(jié)果還可以繪成趨勢圖，一圖看清 HMW 聚集體的面積百分比變化過程（圖 3）。

在線監(jiān)測的結(jié)果顯示了以下的趨勢：

?在線液相色譜系統(tǒng)所生成的數(shù)據(jù)都可用于反饋循環(huán)。

在治療性 mAb 下游工藝中增加的在線液相監(jiān)測手段，能夠及時提供純化過程的關(guān)鍵數(shù)據(jù)，并實時反饋幫助決策，改善產(chǎn)品質(zhì)量并確保工藝可靠。

除此之外，在線液相（液質(zhì)）監(jiān)測還可以擴展至上下游工藝的多個節(jié)點，支持不同監(jiān)測項目，并和其他在線手段結(jié)合，提高對工藝的理解和控制。