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皖儀科技離子色譜法測定血液中亞硝酸根離子

亞硝酸鹽是一種白色或黃色晶體，無臭，味微咸帶澀，易溶于水，微溶于醇和醚，被廣泛用作化工原料，分析試劑及食品加工中的防腐劑和著色劑等。因其色白味咸，常容易誤食，有時也被人用來投毒。許多食物中含硝酸鹽，在特定條件下會被還原成亞硝酸鹽。亞硝酸鹽用途廣泛，而在醫(yī)學(xué)實踐中?？捎龅絹喯跛猁}中毒的事件或案件。

一次性食入0.2～0.5g亞硝酸鹽會引起輕度中毒，食入3g會引起重度中毒。亞硝酸鹽中毒后會造成人體組織缺氧，嚴(yán)重時甚至引起死亡。在亞硝酸鹽中毒案件中，中毒人員往往經(jīng)過醫(yī)院搶救、洗胃催吐，胃液被大量水稀釋，或未被醫(yī)院所保留，失去檢驗條件，給檢驗工作帶來一定的困難，因此提出一種行之有效的方法來檢驗血液中的亞硝酸鹽，就可以解決實際辦案中存在的問題。

目前亞硝酸鹽含量的測定方法主要有鎘柱法、分光光度法、示波極譜法、離子色譜法等。本文主要介紹離子色譜法檢測血液中的亞硝酸鹽的方法，前處理簡單、回收率好，靈敏度高，適用于血液中亞硝酸鹽的檢測。

1 實驗部分

1.1 主要儀器與試劑

離子色譜儀：皖儀離子色譜儀IC6200系列，配備電導(dǎo)檢測器、

陰離子抑制器；

自動進(jìn)樣器；

皖儀離子色譜工作站；

色譜柱：陰離子分析柱：250 mm×4 mm；

保護(hù)柱：皖儀諾譜HS-5AG（50 mm×4 mm）；

前處理小柱：RP柱、Na柱、Ag柱，皖儀諾譜；

NO₂^–標(biāo)準(zhǔn)溶液：質(zhì)量濃度均為1 000 μg／mL，安譜公司。

實驗用水為皖儀科技超純水凈化器制備，電導(dǎo)率為 18.2 MΩ · cm（25 ℃）。

1.1 溶液配制

精確移取NO₂^–標(biāo)準(zhǔn)溶液分別置于不同的容量瓶中，用超純水定容至刻度線，搖勻，配制成NO₂^–離子的質(zhì)量濃度為適合樣品檢測的混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。具體濃度范圍見表1。

1.1 儀器工作條件

色譜柱：陰離子分析柱：250 mm×4 mm；

色譜柱溫度：30 ℃；

電導(dǎo)池溫度：35 ℃；

淋洗液：KOH溶液；

梯度淋洗：詳見表2；

流量：1.0 mL／min ；

抑制器電流：120 mA ；

進(jìn)樣體積：100 μL。

1.4 樣品的預(yù)處理

精確量取0.5mL血液，加1.0 mL超純水、4.5mL乙腈，渦旋、離心。上清液過活化好的RP柱、Ag柱、Na柱和微孔過濾膜（水系，0.45μm），棄除前面流出的3mL濾液，收集后流出的濾液于進(jìn)樣瓶中，上機(jī)檢測分析。

2 結(jié)果與討論

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線與線性范圍

按照表1所需濃度配制混合標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。在色譜條件1.3下進(jìn)樣檢測，同時記錄色譜圖。得到NO₂^–離子標(biāo)準(zhǔn)色譜圖如圖1、2所示。由圖可知，目標(biāo)NO₂^–離子峰形對稱，形狀尖銳，分離度良好。以樣品濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，結(jié)果顯示標(biāo)準(zhǔn)溶液在表格要求范圍內(nèi)線性相關(guān)系數(shù)R大于0.999，線性良好。

              圖1. NO₂^-離子標(biāo)準(zhǔn)曲線疊加圖

            圖2. NO₂^-離子標(biāo)準(zhǔn)曲線疊加圖（局部放大）

                 圖3. NO₂^-離子標(biāo)準(zhǔn)曲線

2.2 樣品結(jié)果

在 1.3儀器工作條件下，對1.4處理后的樣品進(jìn)行檢測。典型樣品離子色譜圖如圖4所示。

可見樣品中目標(biāo)NO₂^-離子峰形對稱，分離度良好。最終得到血液樣品中NO₂^-離子的含量。