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            安徽皖儀科技股份有限公司

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            皖儀科技液相色譜測定人參中的人參皂苷

            閱讀:376      發(fā)布時間:2024-3-18
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            皖儀科技液相色譜測定人參中的人參皂苷


            前言

             

            人參皂苷是人參的重要活性成分,屬于三萜類糖苷化合物,可分為原人參二醇組皂苷(PPD型皂苷)、原人參三醇組皂苷(PPT型皂苷)和齊墩果烷型等。目前,已從人參根中分離出40多種人參皂苷。

            人參皂苷具有抗氧化、抗炎、血管舒張、抗過敏、抗糖尿病等多種治療作用。一些人參皂苷通過減少DNA損傷、減少宿主對突變的易感性、增加免疫監(jiān)測和細(xì)胞凋亡等顯示其抗癌特性。此外,人參皂苷還能有效改善傳統(tǒng)化療藥物的療效,防止對正常組織的損傷。

             

            1 實(shí)驗(yàn)方法

             

            1.1 儀器配置

                        皖儀科技LC3200系列高效液相色譜儀

             

                    表1 高效液相色譜系統(tǒng)配置清單

            1.2 測試條件

            色譜柱:C18,5μm,4.6×250mm;

            柱溫:35℃;

            檢測波長:203nm;

            流速:1.0mL/min;

            流動相:A:乙腈;B:

            進(jìn)樣量:10μL;


                             表2 梯度條件

            1.3 儀器及試劑、耗材    

            試劑:甲醇:色譜純;乙腈:色譜純;標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì):人參皂苷Rg1、人參皂苷Re、人參皂苷Rb1

            輔助裝置:分析天平;溶劑抽濾裝置;超聲波清洗機(jī);

            實(shí)驗(yàn)材料:濾膜:有機(jī)相濾膜,水相濾膜0.45μm

             

            1.4 對照品制備

            n  人參皂苷Rg1對照品溶液:精密稱定人參皂苷Rg1對照品15.0mg,置容量瓶中,用甲醇稀釋定容至10mL,制成1.5mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

            n  人參皂苷Re對照品溶液:精密稱定人參皂苷Rg1對照品9.0mg,置容量瓶中,用甲醇稀釋定容至10mL,制成0.9mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

            n  人參皂苷Rb1對照品溶液:精密稱定人參皂苷Rg1對照品15.0mg,置容量瓶中,用甲醇稀釋定容至10mL,制成1.5mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

            混合對照品溶液:分別取人參皂苷Rg1對照品、人參皂苷Re對照品、人參皂苷Rb1對照品,加甲醇制成每1mL中含人參皂苷Rg10.5mg、人參皂苷Re0.3mg、人參皂苷Rb10.5mg的混合溶液。

            n  人參皂苷Rg1標(biāo)準(zhǔn)系列溶液:取人參皂苷Rg1對照品溶液稀釋制成1mg/L5mg/L、10mg/L、25mg/L50mg/L、100mg/L500mg/L標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。


            2 結(jié)果與討論

             

            2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線

                  圖1人參皂苷Rg1標(biāo)準(zhǔn)曲線及相關(guān)系數(shù)

            說明:人參皂苷Rg1標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍較好,線性相關(guān)系數(shù)>0.9999。2.2 標(biāo)準(zhǔn)品

                      圖2 人參皂苷Rg1標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖

             

                        表3 人參皂苷Rg1色譜參數(shù)


                     圖3 人參皂苷Rb標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖


                       表4 人參皂苷Rb色譜參數(shù)


                       圖4 人參皂苷Rb標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖

             

                        表5 人參皂苷Rb色譜參數(shù)


            2.3 混標(biāo)

                      圖5 人參皂苷混合標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖

             

                     表6 人參皂苷混合標(biāo)準(zhǔn)品色譜參數(shù)


            說明:由上述混標(biāo)譜圖可見,樣品分離較好,樣品分離度在2.2以上,滿足分離要求。2.3 樣品重復(fù)性


                      圖6 人參皂苷混合標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖

             

            7 人參皂苷Rg1、Re、Rb1標(biāo)準(zhǔn)品重復(fù)性色譜參數(shù)

            說明:重復(fù)性較好,人參皂苷Rg1保留時間RSD值為0.437%,峰面積RSD值為0.443%;人參皂苷Re保留時間RSD值為0.343%,峰面積RSD值為0.396%;人參皂苷Rb1保留時間RSD值為0.479%,峰面積RSD值為0.382%。


            3 結(jié)論

             

            本次采用皖儀科技高效液相色譜儀配置二極管陣列檢測器,依據(jù)《中國藥典》2020版對人參皂苷進(jìn)行含量測定,由上述數(shù)據(jù)可知,標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍較好,線性相關(guān)系數(shù)>0.9999;人參皂苷Rg1、人參皂苷Re、人參皂苷Rb1理論塔板數(shù)分別為91232、46835192000,符合藥典要求理論板數(shù)按人參皂苷Rg1峰計算應(yīng)不低于6000;重復(fù)性較好,人參皂苷Rg1保留時間RSD值為0.437%,峰面積RSD值為0.443%;人參皂苷Re保留時間RSD值為0.343%,峰面積RSD值為0.396%;人參皂苷Rb1保留時間RSD值為0.479%,峰面積RSD值為0.382%;人參皂苷Rg1、Re、Rb1對照品分離較好,樣品分離度在2.2以上,滿足分離要求。





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