土壤全磷含量試劑盒說明書
微量法100管/96樣
注 意 ：正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義：
土壤全磷包括有機磷和無機磷，有機質(zhì)中的有機磷可受土壤微生物的分解，轉(zhuǎn)化為無機磷，可供植物吸收利用，土壤中磷素營養(yǎng)狀況影響作物的產(chǎn)量和質(zhì)量，而土壤的全磷主要來自土母質(zhì)和施用的肥料，反映了土壤潛在的供磷能力。
測定原理：
混合酸高溫消解土壤樣品，采用鉬銻抗比色法測定樣品中的磷含量。
自備實驗用品及儀器：
消解儀、消化管、天平、烘箱、100目篩、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、移液管、濃硫酸、高氯酸。
試劑組成和配制：
試劑一：液體50mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：粉劑×1支，4℃避光保存。臨用前加0.2mL蒸餾水溶解。
試劑三：液體0.4mL×1支，4℃保存。
工作液：臨用前將試劑二和試劑三充分混勻，加19.4mL蒸餾水混勻。
樣本處理：
新鮮土樣風干或50℃烘干，過100目篩，稱0.5g左右置于消化管中，加1mL蒸餾水潤濕樣品，再加10mL濃硫酸，搖勻后加入高氯酸0.2mL，輕輕搖勻，同時做兩個樣品空白管，置于消解儀上，消解參數(shù)設置為：100℃，10min；200℃，10min；350℃，20min；400℃，30min。消解結(jié)束后用蒸餾水定容至100mL，靜置后分別取1mL樣品空白及樣品消解液，分別加入0.5mL試劑一混勻作為待測樣品。
測定操作表：
空白管 | 測定管 | |
樣本（μL） | 20 | |
空白消解液（μL） | 20 | |
工作液（μL） | 180 | 180 |
充分混勻，25℃靜置30min | ||
于微量石英比色皿/96孔板，蒸餾水調(diào)零，測定700nm處吸光值A(chǔ)，分別記為A空白管和A測定管，△A=A測定管-A空白管 | ||
注意：空白管只需測定一次。
計算公式：
a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標準曲線：y = 2.1476x -0.0011，R2 = 0.9983; (x為標準磷濃度，μmol/mL；y為吸光值A(chǔ))
全磷含量（g/kg）=（△A+0.0011）÷2.1476×V總÷W×10-3×31
= 1.443×（△A+0.0011）÷W
V總：加入提取液體積，100mL，W：樣本質(zhì)量，g
b. 用96孔板測定的計算公式如下
標準曲線：y = 1.0738x -0.0011，R2 = 0.9983；(x為標準磷濃度，μmol/mL；y為吸光值A(chǔ))
全磷含量（g/kg）=（△A+0.0011）÷ 1.0738×V總÷W×10-3×31
= 2.887×（△A+0.0011）÷W
V總：加入提取液體積，100mL，W：樣本質(zhì)量，g
注意事項：
1. 配好的試劑3天內(nèi)使用完。
2. Z低檢出限為10mg/Kg。
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