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            首頁   >>   技術(shù)文章   >>   MN9D小鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元細胞培養(yǎng)操作步驟
            
		
            
	
            
        
            
        
            
	
            
				
            
					
            
						
            
						
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            MN9D小鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元細胞培養(yǎng)操作步驟
            
        			
            閱讀：1480      發(fā)布時間：2022-5-7
        				
            
							
				
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             MN9D小鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元細胞別名：MN9D細胞，小鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元細胞，培養(yǎng)環(huán)境：空氣，95%； 二氧化碳 (CO2)，5%。
            細胞培養(yǎng)操作步驟：
            1.吸走多余培養(yǎng)基，加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細胞；
            2.吸干凈PBS后
            加入1mL 0.25%胰-酶-0.53mM EDTA，輕輕搖晃培養(yǎng)皿使胰-酶浸沒細胞表面，培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱消化；
            （細胞對于消化比較敏感，消化過度會嚴重影響細胞狀態(tài)，導(dǎo)致細胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長。細胞消化到細胞間隙變大但未脫落，可以輕輕吹下時即可終止，禁止消化到細胞*漂浮?；靹蚣毎麜r盡量輕柔，不要吹出大量氣泡。）
            3.加入6-8ml*培養(yǎng)基終止消化，輕輕吹下細胞混勻；
            4.將混勻的細胞1000rpm（約150g）離心3min，棄上清，再用新鮮培養(yǎng)基重懸37度培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)；
            傳代比例: 不同細胞生長速度不一，具體傳代比例視細胞生長速度而定，大部分細胞適用1:3-1:4傳代，生長較慢的細胞可以1:2傳代。
            注意事項：不同品牌胰-酶消化時間差別較大，注意嚴格控制消化時間消化傳代細胞時吹打細胞注意盡量輕柔，不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細胞狀態(tài)。
            
        		
            
        		
			
            
        
            
    
            
	 		 
	
            
		
            
			
            
				
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