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液相色譜儀色譜柱的分離條件
閱讀：826 發(fā)布時間：2015-11-24
多數(shù)液相色譜儀色譜柱有很寬的試驗條件范圍，但具體應(yīng)用又受到限制，主要是pH值、柱溫和流動相的選擇。
傳統(tǒng)硅膠為基質(zhì)的鍵合相要求pH值在2~8之間，pH值的流動相能“溶解"硅膠，使鍵合相流失。結(jié)構(gòu)非堿性組分的保留不斷減少，堿性組分的保留增加，引起堿性組分峰變寬。如果一定要用高或低pH值的流動相，可加保護(hù)柱。保護(hù)柱裝在泵和進(jìn)樣閥之間，用分析柱相同的填料填裝，或用普通硅膠。硅膠飽和了流動相，減少了分析柱填料的損失。保護(hù)柱不要求柱效高，用價格低的一般硅膠疏松的填裝，按期檢查硅膠的溶解情況。用保護(hù)柱也有不利的影響，即新流動相難以平衡，保留時間不穩(wěn)定或穩(wěn)定慢。使用了保護(hù)柱一定要加流路過過濾器，以防止硅膠微粒引起的麻煩。目前很多檢測儀器廠商開發(fā)了滿足低或高pH值緩沖液的色譜柱填料，具有很好的穩(wěn)定性。
以硅膠為基質(zhì)的柱和陰離子交換柱超過60℃后，會增加對流動相中化學(xué)物質(zhì)的吸附。在高溫下用小顆粒柱引起床塌陷，降低柱效，改變峰形。
有些流動相中的溶劑不能用于某些柱，如小顆粒的聚苯乙烯填料不能用于非水的排阻色譜。另一方面，有些柱與某些溶劑一旦達(dá)到平衡，不要隨意改用其它溶劑。