HGC-27細(xì)胞是一種來源于人胃癌患者轉(zhuǎn)移性淋巴結(jié)的低分化胃癌細(xì)胞系，具有較強的侵襲性和增殖能力，常用于研究胃癌的分子機制、藥物篩選以及侵襲與轉(zhuǎn)移特性分析。它在體外呈上皮樣貼壁生長，呈多角形或短梭形，以單層形式生長。能夠在免疫缺陷小鼠中形成移植瘤，是胃癌相關(guān)研究的重要模型。
? 細(xì)胞來源：建議從ATCC/中科院細(xì)胞庫獲取（批號可溯源）
? 培養(yǎng)基：RPMI-1640 + 10% FBS + 1%雙抗（Gibco品牌優(yōu)選）
? 儀器：37℃恒溫CO?培養(yǎng)箱（CO?濃度5%）、生物安全柜（潔凈度100級）
快速解凍37℃水浴≤2分鐘離心去DMSO1000rpm×5min重懸接種初始密度2×10? cells/cm2
?? 防凍傷要點：解凍后立即轉(zhuǎn)移至預(yù)溫培養(yǎng)基
消化控制：0.25%胰酶（含EDTA）作用2-3分鐘（鏡下觀察細(xì)胞變圓）
終止技巧：加入含血清培養(yǎng)基（體積≥3倍消化液）
分瓶比例：1:3至1:4（24-48小時可達(dá)80%融合度）
凍存液配方：90% FBS + 10% DMSO（現(xiàn)用現(xiàn)配）
程序降溫：4℃ 30min → -20℃ 2h → 液氮長期保存
| 常見問題 | 原因分析 | 應(yīng)對措施 |
|---|---|---|
| 增殖緩慢 | 血清批次差異/FBS濃度不足 | 更換優(yōu)質(zhì)血清（≥南美產(chǎn)地） |
| 細(xì)胞漂浮 | 消化過度/支原體污染 | 縮短消化時間/PCR檢測 |
| 黑點污染 | 真菌孢子污染 | 棄用全批+環(huán)境紫外滅菌 |
?? 注意事項（提升實驗成功率）
狀態(tài)監(jiān)控：每日觀察細(xì)胞形態(tài)（貼壁率＜50%需排查）
傳代周期：不超過30代（建議定期STR鑒定）
污染預(yù)防：操作前紫外滅菌30min，試劑瓶酒精噴淋
ATCC代理——天津益元利康生物科技有限公司，成立于2018年，坐落于天津經(jīng)濟技術(shù)開發(fā)區(qū)。公司產(chǎn)品線涉及細(xì)胞與基因治療、免疫學(xué)、分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)等多個方向，專注于生命科學(xué)試劑、耗材、細(xì)胞、儀器等產(chǎn)品銷售，經(jīng)營的品牌主要有：ThermoFisher、Sigma、Qiagen、EZBioscience、ZYMO Research、MedKoo、Abcam、BioLegend等等。我們提供質(zhì)優(yōu)價美的產(chǎn)品、及時到位的服務(wù)，努力成長為生命科學(xué)和生物技術(shù)企業(yè)的優(yōu)質(zhì)供應(yīng)商。
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