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貨物所在地：天津天津市
所在地： 美國
更新時間：2024-12-12 13:43:45
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產(chǎn)品簡介：
PEI線性轉(zhuǎn)染試劑是以一種陽離子高分子聚合物-聚乙烯亞胺(polyethylenimine，PEI)為載體的基因轉(zhuǎn)染試劑。PEI是在pH中性溶液中具有*正電荷密度的合成聚合物。帶正電的PEI與帶負電的DNA牢固結(jié)合，并賦予凈陽離子電荷，使DNA進入細胞。
應用范圍：能夠高效率轉(zhuǎn)染多種細胞系，包括貼壁細胞和懸浮細胞。
產(chǎn)品優(yōu)勢：低毒，高效；操作簡單，高性價比；具有可重復性的轉(zhuǎn)染結(jié)果；適用于快速、高通量轉(zhuǎn)染流程轉(zhuǎn)染步驟:
-以HEK293貼壁細胞為例，步驟如下：
1. 細胞接種：細胞密度2-6 x106 cells/mL.
2. 質(zhì)粒的準備：在5％最終培養(yǎng)體積的DMEM或培養(yǎng)基中，每10 6個細胞稀釋1.0 ug pDNA。
3. PEI的準備：在5％最終培養(yǎng)體積的DMEM或培養(yǎng)基中，每10 6個細胞稀釋3.0 ug PEI Prime，混勻
4. 通過快速，短暫渦旋或顛倒數(shù)次試管，將pDNA和PEI Prime溶液混合在一起。
5. 使pDNA和PEI的混合物在室溫下靜置10分鐘。
6. 一邊旋轉(zhuǎn)板，一邊將pDNA和PEI混合物逐漸滴加到細胞中。
7. 于37℃ CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
轉(zhuǎn)染的優(yōu)化：
為達到高轉(zhuǎn)染效率和低細胞毒性的良好結(jié)果，可以進行如下優(yōu)化：
| 參數(shù) | 范圍 |
| PEI濃度 | 3.50-6.50mg/（L final culture） |
| DNA濃度 | 0.75-1.5mg/（L final culture） |
| PEI/DNA混勻時間 | 5.0-15.0minutes |
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