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DAPI染料

產(chǎn)品貨號：DAPI01-1

儲存條件：2-8℃。常溫運(yùn)輸。粉末在室溫下穩(wěn)定，需避光儲存。

產(chǎn)品描述

DAPI是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料。和雙鏈DNA結(jié)合后可以產(chǎn)生比DAPI自身強(qiáng)20多倍的熒光。和EB(ethidium bromide)相比，對雙鏈DNA的染色靈敏度要高很多倍。DAPI染色常用于細(xì)胞凋亡檢測，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測。DAPI也常用于普通的細(xì)胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色。DAPI的最da激發(fā)波長為340nm，最da發(fā)射波長為488nm；DAPI和雙鏈DNA結(jié)合后，最da激發(fā)波長為364nm，最da發(fā)射波長為454nm。本DAPI溶液用水配制，加熱有助于溶解。

用于細(xì)胞核染色時(shí)，推薦的DAPI工作濃度為0.5-10μg/ml。

配制母液

用雙蒸水溶解，終濃度為1mg/ml。本產(chǎn)品不可以用緩沖液直接溶解。-20℃可保存1年，建議分裝保存，避免反復(fù)凍融。

使用方法

1.配制工作液：用雙蒸水或PBS稀釋母液，配制成所需要的工作的濃度（0.5-10μg/ml）。

2.固定的細(xì)胞或組織染色：

對于固定的細(xì)胞或組織樣品，固定后，適當(dāng)洗滌去除固定劑。DAPI染色通常在其他染色的最后進(jìn)行。如果不需要進(jìn)行其它染色，則直接進(jìn)行DAPI染色。

a)對于貼壁細(xì)胞或組織切片：加入適量DAPI染色液，覆蓋住樣品即可。

對于懸浮細(xì)胞：至少加入待測染色樣品體積3倍的染色液，混勻。室溫放置3-5分鐘。

b)吸除DAPI染色液，用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次，每次3-5分鐘。

c)直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發(fā)波長360nm，發(fā)射波長460nm。

3.活細(xì)胞或組織染色：

a)細(xì)胞培養(yǎng)物中加入適量DAPI染色液，約1/10細(xì)胞培養(yǎng)基體積，必須充分覆蓋住待染色的樣品。通常對于六孔板一個(gè)孔需加入1ml染色液，對于96孔板一個(gè)孔需加入100μl染色液。

b)在37℃培養(yǎng)細(xì)胞 10～20 分鐘。

c)用PBS或合適的緩沖液洗細(xì)胞兩次。

d)直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發(fā)波長360nm，發(fā)射波長460nm。

注意事項(xiàng)

1)DAPI對人體有一定刺激性，請注意適當(dāng)防護(hù)。

2)熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測。

3)為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。

4)為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。