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谷胱甘肽瓊脂糖磁珠

MCE 國際站：Glutathione Magnetic Agarose Beads

品牌：MedChemExpress (MCE)

存儲(chǔ)條件：4°C，2 年

簡介：MCE Glutathione Magnetic Agarose Beads 可用于純化各表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)的谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶、谷胱甘肽依賴性蛋白和谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶的重組衍生物。

概述：MCE Glutathione Magnetic Agarose Beads 以磁性交聯(lián)瓊脂糖為基質(zhì)，表面共價(jià)偶聯(lián) GSH 配基，可用于純化各表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)的谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶、谷胱甘肽依賴性蛋白和谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶的重組衍生物。本品儲(chǔ)存于 20%乙醇中， MCE Glutathione Magnetic Agarose Beads 占懸浮液總體積的 20%，使用前需將產(chǎn)品充分重懸混勻后吸取。本產(chǎn)品可通過磁力架(MCE 產(chǎn)品目錄號(hào)：HY-K0200)或自動(dòng)分離儀器直接從生物樣品中一步純化出高純度的目標(biāo)蛋白，極大地簡化純化工藝和提高純化效率。MCE Glutathione Magnetic Agarose Beads 具有較高的 GST 標(biāo)簽融合蛋白加載容量 (5-10 mg 蛋白/mL Settled Beads)，也可用于 GST-tag 蛋白的 Pull-down 實(shí)驗(yàn)。

描述：

MCE 谷胱甘肽磁性瓊脂糖珠基于磁性交聯(lián)瓊脂糖，可有效純化各種規(guī)模的高水平過表達(dá) GST 標(biāo)記融合蛋白。 MCE 谷胱甘肽磁性瓊脂糖珠具有高蛋白質(zhì)結(jié)合能力和穩(wěn)定性，使其成為大腸桿菌、酵母、昆蟲和哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)中表達(dá)的 GST 標(biāo)記融合蛋白的高性能純化的理想選擇。

•   方便省時(shí)。

•   低非特異性結(jié)合。

•   樣品損失最小。

•   蛋白質(zhì)結(jié)合能力高達(dá) 5-10 mg/mL 沉降珠。

•   穩(wěn)定，一瓶解決方案。

操作說明：GST 標(biāo)簽蛋白純化(1) 瓊脂糖磁珠預(yù)處理混懸 Glutathione Magnetic Agarose Beads，根據(jù)樣品裂解液中 GST 融合蛋白的量吸取適量的瓊脂糖磁珠，置于離心管中，加入適量的平衡/洗滌緩沖液，充分混懸，置于磁力架上磁性分離，棄上清；重復(fù)以上洗滌步驟 2 次。(2) 樣品的結(jié)合加入適量的樣品裂解液，充分混懸，置于翻轉(zhuǎn)混合儀孵育 (室溫，30 分鐘；4℃，1 小時(shí))，磁性分離，收集瓊脂糖磁珠。上清液收集于新的離心管中，以備后續(xù)檢測使用。(3) 洗滌加入 2 倍瓊脂糖磁珠體積的平衡/洗滌緩沖液，充分混懸，磁性分離，棄上清。重復(fù)以上洗滌步驟 2 次。(4) 洗脫加入 3-5 倍瓊脂糖磁珠體積的洗脫緩沖液，充分混懸，置于翻轉(zhuǎn)混合儀或手工輕輕翻轉(zhuǎn)離心管，室溫孵育 5-10 分鐘。分離磁珠，收集上清至新的離心管，即為洗脫完成的目的蛋白，樣品用于后期功能分析。蛋白 Pull-Down 實(shí)驗(yàn)(1) 瓊脂糖磁珠預(yù)處理混懸 Glutathione Magnetic Agarose Beads，取 100 μL 瓊脂糖磁珠，置于 1.5 mL EP管中，加入 500 μL 平衡/洗滌緩沖液，充分混懸，置于磁力架上磁性分離，棄上清。重復(fù)以上洗滌步驟 2 次。(2) 靶蛋白-瓊脂糖磁珠的結(jié)合a. 在上述分離得到的磁珠中加入 500 μL 含 GST 標(biāo)簽的靶蛋白樣品，充分混懸，置于翻轉(zhuǎn)混合儀孵育 (室溫，30 分鐘；4℃，1 小時(shí))，磁性分離，棄上清。b. 加入 1 mL 平衡/洗滌緩沖液，充分混懸磁珠，磁性分離，棄上清，重復(fù)以上洗滌步驟 2 次，得到 GST 融合蛋白-磁珠復(fù)合物。(3) 目標(biāo)蛋白與 GST 融合蛋白-磁珠復(fù)合物的結(jié)合a. 加入 500 μL 含目標(biāo)蛋白的樣品裂解液，充分混懸，置于翻轉(zhuǎn)混合儀孵育 (室溫，30 分鐘)，磁性分離，收集瓊脂糖磁珠。上清液收集于新的 EP 管中，以備后續(xù)檢測使用。b. 在上述分離得到的磁珠中加入 1 mL 平衡/洗滌緩沖液，充分混懸磁珠，磁性分離，棄上清，重復(fù)以上洗滌步驟 2 次。(4) 洗脫在上述 EP 管中加入 3-5 倍瓊脂糖磁珠體積的洗脫緩沖液，充分混懸，置于翻轉(zhuǎn)混合儀或手工輕輕翻轉(zhuǎn)離心管，室溫孵育 5-10 分鐘。分離磁珠，收集上清至新的 EP 管，即得到 GST 融合蛋白與目標(biāo)蛋白的復(fù)合物。

注意事項(xiàng)：(1) 本產(chǎn)品 pH 值為 6-8，禁止凍結(jié)。(2) 本產(chǎn)品應(yīng)避免離心、干燥或凍存，禁止長時(shí)間置于磁場，可能會(huì)引起磁珠聚團(tuán)，降低結(jié)合活性。(3) 本產(chǎn)品可重復(fù)使用，若純化不同種類蛋白時(shí)，建議使用新的瓊脂糖磁珠。(4) 從磁珠保存管中移取磁珠前應(yīng)充分振蕩混勻，操作過程中動(dòng)作應(yīng)輕柔，并避免產(chǎn)生氣泡。(5) 為最大限度的降低蛋白質(zhì)降解，請(qǐng)配合使用 MCE 蛋白酶抑制劑 cocktails (MCE 產(chǎn)品目錄號(hào)：HY-K0010，HY-K0011)。(6) 樣品及緩沖液中加入 1-10 mM 的 DTT，有助于提高部分 GST 融合蛋白與瓊脂糖磁珠的結(jié)合。(7) 如果目的蛋白沒有被洗脫下來，可能原因?yàn)橄疵撘褐械倪€原型谷胱甘肽被氧化，因此建議使用新鮮配制的洗脫液。(8) 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品。(9) 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

銷售產(chǎn)品：Pyrithione  | 2-Hydroxybutyric acid  | L-Glutamic acid  | Trimethylamine N-oxide  | Ociperlimab  | Procyanidin B2  | IPR-803  | Micafungin (sodium)  | DCLK1-IN-1  | Vitamin D3

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