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            嘌呤霉素來(lái)源于白黑鏈霉菌是一種氨基糖苷類抗生素 | MedChemExpress (MCE)

            閱讀:138      發(fā)布時(shí)間:2025-1-9
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            嘌呤霉素?zé)o菌溶液

            MCE 國(guó)際站:Puromycin, Sterile

            品牌:MedChemExpress (MCE)

            貨號(hào):HY-K1057

            中文名稱:嘌呤霉素?zé)o菌溶液

            存儲(chǔ)條件:-20℃;2 年

            產(chǎn)品活性:嘌呤霉素來(lái)源于白黑鏈霉菌(Streptomyces alboniger),是一種氨基糖苷類抗生素,可以通過(guò)抑制蛋白質(zhì)合成從而殺死多數(shù)革蘭氏陽(yáng)性菌及各種動(dòng)物或昆蟲(chóng)細(xì)胞,在某種特殊情況下也可有效作用于大腸桿菌。

            生物活性:MCE 即用型嘌呤霉素?zé)o菌溶液,已過(guò)濾除菌,可直接用于細(xì)胞培養(yǎng)。嘌呤霉素來(lái)源于白黑鏈霉菌(Streptomyces alboniger),是一種氨基糖苷類抗生素,可以通過(guò)抑制蛋白質(zhì)合成從而殺死多數(shù)革蘭氏陽(yáng)性菌及各種動(dòng)物或昆蟲(chóng)細(xì)胞,在某種特殊情況下也可有效作用于大腸桿菌。 嘌呤霉素被廣泛用作哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)中的篩選抗生素。其抗性來(lái)自于嘌呤霉素產(chǎn)生(Streptomyces alboniger)內(nèi)發(fā)現(xiàn)的 pac 基因,將此基因?qū)爰?xì)胞可使細(xì)胞獲得嘌呤霉素抗性,從而用于篩選和維持培養(yǎng)攜帶 pac 基因的哺乳動(dòng)物穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株。在某些特定情況下,也可以用來(lái)篩選表達(dá) pac 基因的大腸桿菌菌株。

            操作流程:1. 嘌呤霉素溶液的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型、培養(yǎng)基、生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而適當(dāng)調(diào)整。 2. 對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(kill curve),來(lái)確定最佳篩選濃度 1) 以 20-25% 的細(xì)胞密度鋪板,鋪?zhàn)銐蛄康目滓赃M(jìn)行后續(xù)的梯度實(shí)驗(yàn),37℃孵育過(guò)夜。 2) 準(zhǔn)備含梯度濃度嘌呤霉素的新鮮培養(yǎng)基為篩選培養(yǎng)基,至少 5 個(gè)梯度。 3) 細(xì)胞過(guò)夜培養(yǎng)后,使用上述配制的篩選培養(yǎng)基替換舊培養(yǎng)基,孵育細(xì)胞。 每個(gè)濃度做 3 個(gè)平行對(duì)照。 4) 約 2-3 天更換新鮮的篩選培養(yǎng)基。每日監(jiān)測(cè)細(xì)胞,觀察活細(xì)胞比例。通常 7-10 天內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的低濃度為篩選用的工作濃度。

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