你以為細胞在培養(yǎng)皿里只是"躺平"？錯！它們可是妥妥的"美食家"。血清——來自血液的黃金液體，就是細胞的滿漢全席！
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血清: 細胞的“五星級外賣"
血清，指血液凝固后，在血漿中除去纖維蛋白原及某些凝血因子后，分離出的淡黃色透明液體。
血清核心作用有哪些?
首先，血清可謂細胞食堂！氨基酸、葡萄糖、維生素、脂質、微量元素……營養(yǎng)直接拉滿，細胞干飯不擺爛！
血清還是貼壁神器！纖維連接蛋白、層粘連蛋白等——貼壁細胞的“強力膠"，防止細胞“躺平變圓" (拒絕 996，但貼壁必須穩(wěn))。
當然，血清還是實驗 Buff：病毒培養(yǎng)、雜交瘤存活、凍存保護……血清在手，科研不愁！
細胞的“米其林廚房"如何煉成?
血清生產流程：血液采集 → 凝固分離 → 三級過濾 → 質檢分裝 → 冷鏈配送。
圖 1. 血清生產流程圖。
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質檢內-幕:
血清屆的“魔鬼面試"
你以為血清隨便就能上崗？它可是要過五關斬六將！涵蓋質量監(jiān)控、微生物驗證、生化檢測等諸多環(huán)節(jié)。當然，實踐出真知！經(jīng)過客戶實踐驗證的血清才是好血清~
血清的質量檢測
血清的客戶驗證
表 1. 文獻研究中的血清使用及培養(yǎng)參考。
實驗驗證 1：趨化實驗
實驗細胞株：THP -1 cells
培養(yǎng)基：RPMI 1640 +10% FBS +1% P/S
細胞密度：1.5×105 個/孔
培養(yǎng)時間：4 h
實驗結果：Mouse MCP-1 有促進 THP-1 細胞正向定向遷移，且呈現(xiàn)出濃度依賴性。
圖 2. 探究 Mouse MCP-1 對 THP -1 趨化的影響。
實驗驗證 2：細胞生長
實驗細胞株：SH-SY5Y cells
培養(yǎng)基：DMEM/F12 培養(yǎng)基 +15% FBS +1% P/S
細胞密度：4.5×103 個/孔
培養(yǎng)時間：48 h
實驗結果：Human Neurofascin 可以促進 SH-SY5Y 細胞突觸延伸。
圖 3. 探究 Human Neurofascin 對 SH-SY5Y 細胞突觸的影響。
實驗驗證 3：劃痕實驗
實驗細胞株：AGS cells
培養(yǎng)基：Ham's F-12 + 10% FBS +1% P/S
細胞密度：2×106 個/孔
培養(yǎng)時間：24 h
實驗結果：Human GRIK 抑制 AGS 細胞的損傷后的“愈合"作用。
圖 4. 探究 Human GRIK2 對 AGS 細胞運動的影響。
實驗驗證 4：細胞增殖實驗
實驗細胞株：Balb/3T3 cells
培養(yǎng)基：DMEM +10% FBS
細胞密度：3×103 個/孔
培養(yǎng)時間：48 h
檢測試劑：CCK8
實驗結果：Human Amphiregulin 可以促進 Balb/3T3 細胞的增殖，ED50=14.39 ng/mL。
圖 5. 探究 Human Amphiregulin 對 Balb/3T3 細胞增殖的影響。
實驗驗證 5：Transwell 遷移實驗
實驗細胞株：PC-3 cells
培養(yǎng)基：Ham's F-12 + 10% FBS +1% P/S
細胞密度：7×104 個/孔
培養(yǎng)時間：24 h
實驗結果：Human Androgen receptor 抑制 PC-3 細胞的遷移，隨著濃度增加，遷移呈現(xiàn)負趨勢。
圖 6. 探究 Androgen receptor 對 PC-3 細胞遷移的影響。
MCE 血清在各細胞系中的驗證
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靈魂拷問:
血清使用的終-極難題
1. 血清應該如何保存？
經(jīng)常使用的血清分裝后保存在 -20℃ 即可，長期保存建議保存在 -80℃。反復凍融會導致血清有沉淀析出，建議將大規(guī)格血清分裝成單次使用規(guī)格后保存，按需取用。
低溫保存，拒絕反復凍融?。?！
2. 血清應該如何解凍？
解凍時需要從低溫中取出后，放置于 2-8℃ 冰箱中緩慢解凍，在溶解過程中避免劇烈震蕩，可隔一段時間，緩慢晃動，混合溶解成分并加速溶解過程。不可將血清直接從低溫拿到室溫/25-37℃ 環(huán)境中溶解，巨大的溫度變化容易使血清產生絮狀沉淀，且長時間放置在室溫/25-37℃ 環(huán)境中，容易使血清中活性物質發(fā)生變化，影響細胞生長等。
緩慢升溫，拒絕暴力搖晃?。?！
3. 血清溶解后的沉淀是什么？
血清中出現(xiàn)的沉淀物質可能包括纖維蛋白 (絮狀沉淀)、脂蛋白、冷凝集素、玻連蛋白、胎球蛋白、磷酸鈣與草酸鈣 (顯微鏡下小黑點沉淀) 及膽固醇等。
4. 血清在使用之前需要再次過濾？
血清在生產過程中嚴格執(zhí)行三級過濾 (0.1 μm)，標準的無菌操作，不建議在使用前再次過濾，再次過濾可能會導致血清中營養(yǎng)物質減少。
5. 血清在使用前是否需要熱滅活？
熱滅活是指在 56℃，30 min 處理已經(jīng)完-全解凍的血清，熱滅菌可以使血清中的補體去活化。熱滅活血清對于細胞生長只有微小的促進作用或者沒有作用，但通常會導致細胞生長速度慢，血清中 沉淀物顯著增多等問題。非必要，不建議熱滅活。
6. 我要替換我現(xiàn)在使用的血清，應該怎么操作呢？
細胞對于日常培養(yǎng)條件具有適應性，貿然打破會導致它不適應新的生活環(huán)境，需要先進行馴化。建議復蘇細胞使用原品牌血清，傳代 1-2 代，細胞狀態(tài)穩(wěn)定后，新血清：原血清=1:3 進行第一次換液，新血清逐代提高至 50%，75%，100%，過程注意監(jiān)控細胞狀態(tài)，穩(wěn)定情況下傳代，且需要保持較高的傳代密度。
Tips：文末彩蛋~細胞培養(yǎng)的哲學
細胞如頂流明星，血清是獨-家營養(yǎng)師——科研圈沒有“湊合"的容身之地，只有“硬核"的生存法則！
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小結
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參考文獻：
[1] Yang J,et al. VSTM2L protects prostate cancer cells against ferroptosis via inhibiting VDAC1 oligomerization and maintaining mitochondria homeostasis. Nat Commun. 2025 Jan 29;16(1):1160.
[2] Han H, et al. Therapeutic potential of monomethyl fumarate and aluminum ion combination in alleviating inflammation and oxidative stress in psoriasis. Redox Biol. 2025 Feb;79:103482.
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