CryoStor® CS10是一種無(wú)血清、即用型細(xì)胞凍存液，專為細(xì)胞和組織的低溫保存設(shè)計(jì)，確保細(xì)胞在冷凍和解凍過(guò)程中保持高活性和功能完整性。以下是詳細(xì)的使用說(shuō)明：
1. 產(chǎn)品基本信息
產(chǎn)品名稱：CryoStor® CS10 (100-1061)
規(guī)格：通常提供 100 mL 瓶裝。
儲(chǔ)存條件：2°C 至 8°C 冷藏保存，避免冷凍。
有效期：見(jiàn)產(chǎn)品標(biāo)簽，通常為 2 年。
2. 使用前準(zhǔn)備
檢查外觀：確保液體清澈無(wú)沉淀，顏色為淡黃色至無(wú)色。
恢復(fù)至室溫：從冰箱取出后，靜置至室溫（約 15-30 分鐘）。
無(wú)菌操作：在超凈臺(tái)或生物安全柜中進(jìn)行操作，避免污染。
3. 細(xì)胞凍存步驟
（1）細(xì)胞準(zhǔn)備
細(xì)胞狀態(tài)：確保細(xì)胞處于健康狀態(tài)，活率 >90%。
細(xì)胞計(jì)數(shù)：用細(xì)胞計(jì)數(shù)儀或血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，調(diào)整細(xì)胞密度至 1×10^6 至 1×10^7 cells/mL。
離心收集：將細(xì)胞懸液離心（如 300×g，5 分鐘），棄上清。
（2）重懸細(xì)胞
加入 CryoStor® CS10：根據(jù)細(xì)胞沉淀量，加入適量 CryoStor® CS10，輕輕吹打混勻。
分裝：將細(xì)胞懸液分裝至凍存管中，每管 1-2 mL。
（3）冷凍
程序降溫：
使用程序降溫盒或程序降溫儀，以-1°C/min的速率降溫至 -80°C。
若無(wú)程序降溫設(shè)備，可將凍存管放入異丙醇降溫盒，置于 -80°C 冰箱過(guò)夜。
轉(zhuǎn)移至液氮：24 小時(shí)后，將凍存管轉(zhuǎn)移至液氮罐中長(zhǎng)期保存。
4. 細(xì)胞解凍步驟
（1）快速解凍
水浴解凍：將凍存管從液氮中取出，迅速放入 37°C 水浴，輕輕搖晃至完quan解凍（約 1-2 分鐘）。
避免過(guò)熱：解凍后立即從水浴中取出，避免高溫?fù)p傷細(xì)胞。
（2）洗滌細(xì)胞
稀釋 DMSO：將解凍的細(xì)胞懸液緩慢加入預(yù)熱的完quan培養(yǎng)基中（如 10 倍體積），輕輕混勻。
離心：300×g 離心 5 分鐘，棄上清。
重懸：用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，進(jìn)行后續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
5. 注意事項(xiàng)
DMSO 濃度：CryoStor® CS10 含 10% DMSO，部分細(xì)胞可能對(duì) DMSO 敏感，需優(yōu)化濃度。
無(wú)菌操作：全程避免污染，尤其是分裝和解凍步驟。
解凍速度：快速解凍以減少冰晶損傷。
細(xì)胞密度：凍存時(shí)細(xì)胞密度不宜過(guò)高或過(guò)低，推薦 1×10^6 至 1×10^7 cells/mL。
6. 適用細(xì)胞類型
干細(xì)胞：如間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）、造血干細(xì)胞（HSCs）。
免疫細(xì)胞：如 CAR-T 細(xì)胞、NK 細(xì)胞。
原代細(xì)胞：如肝細(xì)胞、神經(jīng)元。
細(xì)胞系：如 HEK293、CHO 細(xì)胞。
7. 常見(jiàn)問(wèn)題解答
（1）CryoStor® CS10 是否可以稀釋？
不建議稀釋，以免影響凍存效果。若需降低 DMSO 濃度，可選擇 CryoStor® CS5（含 5% DMSO）。
（2）凍存后細(xì)胞存活率低怎么辦？
檢查細(xì)胞狀態(tài)：確保凍存前細(xì)胞健康。
優(yōu)化凍存密度：調(diào)整至推薦范圍（1×10^6 至 1×10^7 cells/mL）。
檢查凍存程序：確保降溫速率和解凍速度符合要求。
（3）CryoStor® CS10 是否可以用于組織凍存？
可以，適用于小組織塊的低溫保存，但需根據(jù)組織類型優(yōu)化凍存條件。
總結(jié)
CryoStor® CS10是一款高效、無(wú)血清的細(xì)胞凍存液，適用于多種細(xì)胞類型的低溫保存。通過(guò)規(guī)范的操作步驟和注意事項(xiàng)，可確保細(xì)胞在冷凍和解凍過(guò)程中保持高活性和功能完整性。
STEMCELL CryoStor® CS10代理：柏萊源（天津）生物科技有限公司
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