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            1.1×S4 Fidelity PCR Mix(dye-)
            • 1.1×S4 Fidelity PCR Mix(dye-)

            貨物所在地:天津天津市

            地: 柏萊源(天津)生物科技有限公司

            更新時間:2025-04-01 09:22:05

            瀏覽次數(shù):191

            在線詢價收藏產(chǎn)品

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            1.1×S4 Fidelity PCR Mix(dye-)為1.1×即用型快速PCR預混液,內含S4 Fidelity DNA polymerase、dNTPs以及優(yōu)化的緩沖體系,只需添加引物和模板即可進行擴增,可有效擴增5 kb以內的DNA片段。

            該酶具有5’→3’聚合酶活性和3’→5’外切酶活性,擴增產(chǎn)物為平末端,可直接用于平末端克隆。

            產(chǎn)品特點

            ? 操作簡單:1.1×即用型預混液,無需添加ddH2O,大程度地減少實驗步驟;

            ? 高保真:保真度為野生型Taq酶的30倍;

            ? 極快的延伸速度:10~15 s/kb;

            ? 超高的耐熱性能:98℃熱處理1 h后聚合酶活性無明顯變化。

            產(chǎn)品簡介

            1.1×S4 Fidelity PCR Mix(dye-)為1.1×即用型快速PCR預混液,內含S4 Fidelity DNA polymerase、dNTPs以及優(yōu)化的緩沖體系,只需添加引物和模板即可進行擴增,可有效擴增5 kb以內的DNA片段。

            該酶具有5’→3’聚合酶活性和3’→5’外切酶活性,擴增產(chǎn)物為平末端,可直接用于平末端克隆。


            產(chǎn)品組成


            組分

            規(guī)格

            1.1×S4 Fidelity PCR Mix(dye-) 

            5×1.125 mL





            保存條件 

            -20℃保存 24 個月

            適用范圍 

            本產(chǎn)品適用于以試劑盒提取的基因組 DNA、cDNA 和質粒 DNA 的 PCR 擴增,如基因鑒定、基因克隆等實驗。 

            意事項 

            1. 本產(chǎn)品為 1.1×PCR 預混液,無需額外添加 ddH2O。每次反應中該產(chǎn)品用量至少應占到總反應體積的 85%,50 μL 體系至少使用 43 μL PCR Mix,25 μL 至少使用 21 μL PCR Mix;

            2. 請使用高質量的模板進行擴增,如試劑盒提取的基因組 DNA。請勿使用 dUTP 或含U嘧啶的引物與模板;

            3. 3. PCR Mix 應避免反復凍融,短期內多次使用可置于 4℃保存。

            常見問題與解決辦法 

            Q1:擴增無產(chǎn)物或產(chǎn)物量少? 

            A1: 

            1) 模板降解或模板純度差。電泳檢測模板質量,使用高質量模板; 

            2) 模板濃度過低。適當增加模板用量; 

            3) 引物不合適。優(yōu)化引物設計; 

            4) 退火溫度不合適。設置退火溫度梯度,摸索合適的退火溫度; 

            5) 循環(huán)數(shù)過少。適當增加 5~10 個循環(huán); 

            6) 延伸時間不足。復雜模板可適當增加延伸速度至 20~30 s/kb。 

            Q2:擴增出現(xiàn)非特異條帶或彌散帶? 

            A2 

            1) 引物特異性差。優(yōu)化引物,避免非特異性條帶以及引物二聚體的擴增;

            2) 引物濃度過高。降低引物濃度; 

            3) 模板過量或純度差。減少模板量,使用高質量模板; 

            4) 退火溫度過低。適當提高退火溫度或使用 Touchdown PCR 程序; 

            5) 循環(huán)數(shù)過多。減少循環(huán)數(shù)至 25~30 cycles。

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