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更新時(shí)間：2025-02-17 16:28:15瀏覽次數(shù)：673評(píng)價(jià)
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RNA-PULLDOWN
RNA 與蛋白質(zhì)相互作用是細(xì)胞生理過程中的重要步驟，其中 RNA pull-down 實(shí)驗(yàn)用于研究 RNA 分子與蛋白質(zhì)之間的相互作用關(guān)系。
該方法利用特定標(biāo)記的 RNA 探針（biotinylated RNA）結(jié)合目標(biāo)蛋白質(zhì)，形成 RNA-蛋白質(zhì)復(fù)合物，并通過親和純化形式富集出 RNA 與蛋白質(zhì)復(fù)合物，洗脫實(shí)驗(yàn)后可以通過 Western blot 或質(zhì)譜等技術(shù)鑒定 RNA 與蛋白質(zhì)的結(jié)合情況。
實(shí)驗(yàn)原理
RNA pull-down 實(shí)驗(yàn)基于 RNA 與蛋白質(zhì)的特異性互相識(shí)別和結(jié)合，通過連接生物的素分子的 RNA 寡核苷酸可以特異性地結(jié)合目標(biāo)蛋白質(zhì)。富集 RNA 與蛋白質(zhì)之間的相互作用復(fù)合物后，可通過 Western blot 或質(zhì)譜等技術(shù)進(jìn)一步研究 RNA 與蛋白質(zhì)的結(jié)合情況。
應(yīng)用途徑
RNA-PULLDOWN實(shí)驗(yàn)可以用于研究 RNA 與蛋白質(zhì)之間的相互作用。其重要應(yīng)用包括鑒定 RNA 與蛋白質(zhì)復(fù)合物中的成員、篩選 RNA 結(jié)合蛋白質(zhì)的靶標(biāo)，以及研究 RNA 參與的基因表達(dá)調(diào)控機(jī)制等。
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