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瀏覽次數(shù)賽默飛Varioskan LUX酶標儀簡介與使用說明
一、儀器概述
Varioskan LUX是賽默飛公司推出的一款多功能光學檢測系統(tǒng)，屬于多模式酶標儀。它支持多種檢測模式，包括吸光度（Absorbance）、熒光強度（Fluorescence Intensity）、時間分辨熒光（Time-Resolved Fluorescence, TRF）、發(fā)光（Luminescence）、熒光偏振（Fluorescence Polarization, FP）以及AlphaScreen/AlphaLISA等技術。適用于生物化學、細胞學、分子生物學等研究領域的數(shù)據(jù)采集和分析。
Varioskan LUX采用模塊化光學系統(tǒng)，結合自動化功能、觸控操作界面和軟件平臺SkanIt，滿足科研與高通量檢測需求。其設計強調(diào)用戶體驗簡化與操作靈活性，適配多種微孔板格式（96孔、384孔、1536孔）以及單管檢測。
二、基本原理
Varioskan LUX的工作基于光學檢測原理。不同檢測模式對應不同的光源、探測器與光路設置：
吸光度測量：通過測量樣品對入射光的吸收程度，反映樣品中物質(zhì)濃度。使用氙燈為光源，結合可變波長單色器進行波長掃描。
熒光檢測：熒光探針在激發(fā)光作用下發(fā)出特定波長的發(fā)射光，儀器通過濾光或單色器檢測其強度。適合用于蛋白標記、核酸檢測等實驗。
時間分辨熒光（TRF）：利用發(fā)光延遲特性，提高信噪比，常用于稀有元素標記（如銪）的免疫分析。
發(fā)光檢測：無需激發(fā)光源，直接檢測化學反應或生物發(fā)光產(chǎn)生的光信號，常用于酶促反應或細胞活性分析。
AlphaScreen技術：基于供體和受體微珠間的能量傳遞，實現(xiàn)無洗滌的高靈敏度檢測。
三、儀器組成
Varioskan LUX主要由以下部分構成：
檢測光學系統(tǒng)：包含氙燈、LED光源、單色器、濾光片、探測器等，用于實現(xiàn)多模式檢測。
微孔板模塊：自動托盤系統(tǒng)支持多種孔板格式，并可進行控溫（室溫至+65°C）與震蕩功能。
自動化接口：支持機械臂對接，實現(xiàn)自動進板和連續(xù)檢測。
控制界面：配有內(nèi)置觸控屏，可本地設置參數(shù)或通過SkanIt軟件在計算機端控制。
數(shù)據(jù)分析系統(tǒng)：SkanIt軟件支持實驗設計、數(shù)據(jù)采集、計算、標準曲線擬合及報告輸出。
四、操作流程
1. 儀器準備
開機與自檢：連接電源與計算機，開啟主機，儀器自動進行系統(tǒng)自檢，檢查光源、機械托盤與溫控系統(tǒng)狀態(tài)。
軟件初始化：啟動SkanIt軟件，確認儀器已連接，并進入實驗設置界面。
2. 實驗設置
用戶需在軟件中進行以下設定：
板型選擇：選擇使用的孔板格式（如96孔、384孔）。
檢測模式選擇：根據(jù)實驗類型設定吸光度、熒光、發(fā)光等檢測方式。
波長選擇：輸入所需激發(fā)波長與發(fā)射波長（對于熒光模式），或測量波長（對于吸光度）。
讀取參數(shù)設置：如讀取高度、讀取次數(shù)、讀取順序等。
溫控設置（如需要）：設定孵育溫度及持續(xù)時間。
震蕩模式：選擇線性、軌跡式或雙向震蕩，并設定持續(xù)時間與速度。
3. 樣品準備與裝載
將樣品加至孔板中，避免邊緣效應與氣泡影響。
將孔板正確放入托盤，確保方向一致（A1孔朝左上）。
在軟件中點擊“讀取"，儀器自動啟動檢測。
4. 數(shù)據(jù)采集與分析
檢測過程中，實時顯示原始數(shù)值或信號曲線。
軟件可進行標準曲線構建、濃度計算、數(shù)據(jù)校正與歸一化處理。
支持多組重復實驗、平均值計算與標準差統(tǒng)計。
數(shù)據(jù)可導出為CSV、Excel、PDF等格式，并可自定義報告模板。
五、主要功能與技術參數(shù)
| 功能/參數(shù) | 說明 |
|---|---|
| 吸光度波長范圍 | 200–1000 nm（步長1 nm） |
| 熒光激發(fā)/發(fā)射波長范圍 | 200–850 nm |
| 兼容板型 | 6–1536孔板，兼容定制格式 |
| 溫控范圍 | 室溫至65°C，可編程恒溫 |
| 檢測速度 | 96孔板約15秒，384孔板約1分鐘 |
| 發(fā)光檢測動態(tài)范圍 | 10^9 以上 |
| 自動化接口 | 支持LIMS系統(tǒng)與機械臂對接 |
| 軟件功能 | 曲線擬合、條件篩選、統(tǒng)計分析、多語言支持 |
六、應用領域
Varioskan LUX廣泛應用于多個研究方向：
細胞生物學：細胞活力檢測、凋亡分析、熒光標記蛋白研究。
免疫檢測：ELISA、AlphaLISA、高靈敏抗體篩選。
基因分析：熒光定量PCR前期反應驗證、核酸雜交實驗。
藥物篩選：高通量篩選化合物對酶或受體的作用。
環(huán)境檢測：污染物光學信號檢測、化學反應動力學研究。
七、日常維護與注意事項
1. 日常維護
每日開機前檢查濾光系統(tǒng)與托盤是否干凈。
使用完畢后關閉光源，避免長期曝光。
定期清潔檢測窗口與板托，避免液體殘留。
每季度檢查校準狀態(tài)，必要時聯(lián)系廠商進行專業(yè)校準。
2. 注意事項
使用前詳細閱讀使用手冊，熟悉各項安全規(guī)定。
在使用高敏模式時，盡量避免環(huán)境光干擾。
樣品體積需滿足檢測要求，避免低液面干擾。
切勿在運行中強行取出板托，避免損傷機械系統(tǒng)。
八、故障排查簡表
| 問題 | 可能原因 | 解決方法 |
|---|---|---|
| 不啟動/死機 | 電源未接穩(wěn)、系統(tǒng)崩潰 | 檢查插頭，重啟軟件 |
| 光源不亮 | 燈泡壽命耗盡或松動 | 更換燈泡或重新安裝 |
| 讀數(shù)波動大 | 孔板氣泡、樣品未混勻 | 去除氣泡，重做實驗 |
| 軟件無法識別儀器 | USB端口故障、驅(qū)動未更新 | 更換端口或更新驅(qū)動 |
九、總結
Varioskan LUX酶標儀作為一款多模式光學檢測平臺，適配多種科研與應用場景。其檢測模式全面，操作界面友好，數(shù)據(jù)處理功能豐富，適合從基礎研究到高通量篩選的多種實驗需求。正確掌握儀器功能、規(guī)范操作流程、按時進行維護，有助于確保數(shù)據(jù)準確性與實驗穩(wěn)定性。
如需更高級的使用技巧，如腳本自動控制、結果批處理、復雜曲線擬合等，建議參考SkanIt高級手冊或參加相關技術培訓，以充分發(fā)揮該系統(tǒng)的性能。
