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賽默飛微量紫外分光光度計介紹
一、引言
在分子生物學(xué)、生命科學(xué)、臨床研究等實驗場景中,樣品常常較為珍貴,特別是在處理微量核酸、蛋白質(zhì)樣品時,對檢測靈敏度和樣品體積要求較高。為滿足這類應(yīng)用需求,賽默飛推出了微量紫外分光光度計,其適用于小體積樣品的快速定量分析,尤其適用于DNA、RNA、蛋白質(zhì)等生物大分子的濃度測定和純度評估。
二、工作原理
該類分光光度計基于紫外/可見光區(qū)域的吸收光譜原理工作,通常利用比爾-朗伯定律(Beer-Lambert Law)進行定量分析。通過測量溶液對某一特定波長光的吸收強度,可計算出溶液中溶質(zhì)的濃度。微量紫外分光光度計在光路設(shè)計上采用短光程的固定光路(一般為0.2~1.0 mm),從而適應(yīng)1–2 µL樣品量的檢測,同時提高檢測靈敏度。
三、儀器組成與結(jié)構(gòu)設(shè)計
賽默飛微量紫外分光光度計的基本組成包括以下幾個部分:
光源系統(tǒng):通常配備氘燈和鎢燈,分別提供紫外光(190–360 nm)與可見光(360–850 nm);
微量比色模塊:采用石英平臺或?qū)S梦⒘繖z測頭,無需比色皿,直接滴加樣品;
檢測器:一般使用光電二極管陣列,能夠同時采集多波長數(shù)據(jù),提高測量速度;
操作界面:配備彩色觸控屏,支持獨立操作或通過電腦軟件控制;
數(shù)據(jù)處理與存儲:內(nèi)置分析程序,支持結(jié)果自動生成并導(dǎo)出為多種格式;
校準與維護模塊:部分型號內(nèi)置自動校準功能,減少人工干預(yù)。
四、主要技術(shù)參數(shù)(以NanoDrop One為例)
參數(shù)項目 | 參數(shù)數(shù)值 |
---|---|
波長范圍 | 190–850 nm |
波長精度 | ±1.0 nm |
樣品體積 | 1–2 µL |
光程長度 | 自動切換(0.2 mm和1.0 mm) |
吸光度范圍 | 0.02 – 300 Abs(相當(dāng)于濃度范圍更寬) |
吸光度準確度 | ±3%(at 0.97 Abs) |
樣品檢測時間 | 每樣品約3–5秒 |
樣品恢復(fù) | 無需比色皿,樣品可回收 |
數(shù)據(jù)存儲與導(dǎo)出 | 支持U盤導(dǎo)出、Wi-Fi傳輸、打印等方式 |
尺寸與重量 | 約20×25×15 cm,重量約3.5 kg |
五、功能與操作特點
無需比色皿檢測:只需1–2 µL樣品直接滴加于檢測平臺,適用于低體積生物樣品;
自動檢測并校準光程:系統(tǒng)可根據(jù)樣品濃度自動調(diào)整光程,有效避免飽和吸光;
快速檢測與實時分析:3–5秒內(nèi)完成檢測,適用于高通量樣品處理;
內(nèi)置數(shù)據(jù)庫與結(jié)果解讀:儀器軟件支持實時數(shù)據(jù)解釋,包括純度比值(如A260/A280,A260/A230)自動計算;
用戶友好界面:圖形化操作界面、支持觸控或外接鼠標鍵盤操作,適配不同使用習(xí)慣;
多語言支持與遠程導(dǎo)出:便于國際實驗室使用,支持本地或云端數(shù)據(jù)傳輸;
應(yīng)用向?qū)Чδ?/strong>:內(nèi)置不同樣品類型的分析流程,例如DNA、RNA、蛋白質(zhì)、微生物懸液等。
六、應(yīng)用場景
分子生物學(xué)實驗:用于提取后DNA、RNA濃度及純度檢測;
蛋白質(zhì)研究:蛋白濃度定量分析及污染判斷;
臨床檢測實驗室:樣品制備前質(zhì)量控制;
生物制藥過程監(jiān)測:中試與質(zhì)控過程中的樣品檢測;
農(nóng)業(yè)和食品檢測:動植物樣品中核酸成分分析;
科研教學(xué)單位:教學(xué)示范與本科/研究生實驗室日常檢測任務(wù)。
七、使用注意事項
樣品需均勻混勻:避免樣品不均影響檢測準確性;
平臺需及時清潔:每次檢測后用無菌紙巾或棉簽清理檢測平臺,避免交叉污染;
樣品濃度需在檢測范圍內(nèi):過高濃度需稀釋,防止吸光度超出線性范圍;
環(huán)境干擾控制:應(yīng)放置于干燥、無振動的環(huán)境,避免光線干擾;
定期校準與維護:建議每月至少進行一次儀器光程及吸光度校準;
樣品順序標記清晰:便于后續(xù)數(shù)據(jù)分析與回溯;
避免樣品氣泡:氣泡會干擾光路,影響檢測精度。
八、維護與保養(yǎng)
檢測頭定期清潔:用去離子水或70%乙醇清洗檢測區(qū)域;
避免樣品殘留干結(jié):每次使用后立即清理平臺;
避免尖銳物接觸檢測表面:防止刮傷造成光路誤差;
軟件升級與故障排查:定期檢查軟件版本,并記錄系統(tǒng)報錯信息進行維護。
九、小結(jié)
賽默飛微量紫外分光光度計適用于對樣品量敏感但分析要求嚴格的實驗場景,其設(shè)計兼顧便捷性與實用性,能夠為核酸、蛋白質(zhì)等多種生物樣品的濃度和純度分析提供技術(shù)支撐。通過優(yōu)化樣品檢測流程,用戶可以在短時間內(nèi)獲取所需數(shù)據(jù),提升實驗效率。