2011年12月29日 — 賽默飛世爾科技近期推出Thermo Scientific Fermentas FastDigest快速酶,是為快速DNA酶切專門研發(fā)的進階版限制性內(nèi)切酶。在30年的內(nèi)切酶研究當中,我們積累的限制性內(nèi)切酶生產(chǎn)菌株庫是業(yè)內(nèi)的限制性內(nèi)切酶生產(chǎn)菌株庫之一。大量可供選擇的同裂酶和優(yōu)異的生產(chǎn)能力促進了這個包含176種FastDigest快酶的系統(tǒng)的誕生。 所有FastDigest快速酶在通用的FastDigest緩沖液和FastDigest Green綠色緩沖液中都具有99%活性,并可在5-15分鐘內(nèi)迅速完成酶切。這就使得任意限制酶組合都能夠在同一反應管中同時反應,避免了連續(xù)酶切。此外,F(xiàn)astDigest Green綠色緩沖液兼具上樣緩沖液的功能,可直接將反應物上樣凝膠電泳,操作更為便利。 FastDigest快速酶可用于酶切質(zhì)粒、基因組DNA、病毒DNA以及PCR產(chǎn)物。酶切時間和實驗方案已經(jīng)過實驗驗證,每種快速酶及其作用的模板都有相應的酶切時間和實驗方案提供。FastDigest系列尤其適合對于反應組分純度、性能穩(wěn)定性和反應體系配制簡單化要求的應用。 特點 - 所有FastDigest快酶在通用緩沖液中都具有99%活性
- 5-15分鐘酶切
- FastDigest通用緩沖液與所有下游應用99%兼容
- 直接上樣凝膠電泳
- 共有176種FastDigest快酶可供選擇
應用 DNA/RNA 修飾酶 | 在FastDigest緩沖液和 FastDigest Green綠色 緩沖液中的活性 |
DNA Polymerase I, E.coli | 99% |
Klenow Fragment | 99% |
Klenow Fragment, exo | 99% |
T7 DNA Polymerase | 99% |
T4 DNA Ligase* | 75-99% |
FastAPTM Thermosensitive Alkaline Phosphatase | 99% |
T4 Polynucleotide Kinase | 99% |
*T4 DNA連接酶活性需要 0.5mM ATP
通用緩沖液和直接凝膠上樣
所有FastDigest快酶在FastDigest Green綠色緩沖液中都具有99%活性。此外FastDigest Green綠色緩沖液中還包含密度試劑和兩種示蹤染料,從而可直接將反應產(chǎn)物添加到點樣孔中。藍色染料在1%瓊脂糖凝膠
中的遷移率與3-5kb DNA片段接近, 并在424nm時出現(xiàn)激發(fā)峰;而黃色染料在1%瓊脂糖凝膠中的遷移速度稍快于10bp DNA片段,在615nm時出現(xiàn)激發(fā)峰。
FastDigest Green綠色緩沖液和無色緩沖液一樣可進行高性能的DNA酶切和下游應用。對于需要用熒光激發(fā)進行酶切產(chǎn)物分析的應用(例如,在紫外光下測量濃度),我們建議使用無色的FastDigest緩沖液。
FastDigest Green綠色緩沖液
含有FastDigest Green綠色緩沖液的反應混合物
A: 電泳前,加入點樣孔中的反應混合物;B: 電泳后,在凝膠中得到分離的條帶
用FastDigest快速酶在FastDigest Green綠色緩沖液中5分鐘內(nèi)進行質(zhì)粒DNA的三重酶切和連接 M:Thermo Scientific Fermentas GeneRuler Express DNA Ladder (#SM1551)
C:未酶切的質(zhì)粒DNA對照
1:在FastDigest緩沖液中用FastDigest EcoRI、FastDigest KpnI和FastDigest SmaI對質(zhì)粒DNA進行三重酶切;2:在FastDigest緩沖液中的酶切和連接反應混合物
3:在FastDigest Green綠色緩沖液中用FastDigest EcoRI、FastDigest KpnI和FastDigest SmaI對質(zhì)粒DNA進行三重酶切;4:在FastDigest Green綠色緩沖液中的酶切和連接反應混合物
5分鐘內(nèi)酶切DNA - 在1種緩沖液中5-15分鐘內(nèi)可 進行雙重和多重酶切
- 高通量應用的理想選擇
- 所有種類的DNA模板都提供相應的酶切時間:質(zhì)粒DNA、PCR產(chǎn)物、基因組DNA
- 任何模板都不需要酶切過夜
- 沒有星活性——無需延長孵育時間
用FastDigest酶和傳統(tǒng)內(nèi)切酶進行質(zhì)粒DNA酶切的比較
M:GeneRulerTM 1kb Plus DNA Ladder;C:未酶切的質(zhì)粒DNA
1:用FastDigest Xhol 5分鐘內(nèi)酶切質(zhì)粒DNA;2:用FastDigest ApaI 5分鐘內(nèi)酶切質(zhì)粒DNA
3:用FastDigest Xhol和FastDigest ApaI 5分鐘內(nèi)雙酶切質(zhì)粒DNA;4:用Apal酶切質(zhì)粒DNA 1小時
5:用Xhol酶切質(zhì)粒DNA 1小時;6:在1X Tango緩沖液中用4倍的ApaI過量酶切質(zhì)粒DNA 1小時,然后在2X Tango緩沖液中用XhoI再酶切1小時
雙酶切可節(jié)省超過2個小時
FastDigest限制性內(nèi)切酶為DNA酶建立新的標準
的生產(chǎn)工藝
● 所有生產(chǎn)均在符合歐盟指令和ISPE規(guī)范標準的D級潔凈空間內(nèi)進行
● 嚴格的質(zhì)控
● 依照ISO9001質(zhì)量管理體系和ISO14001環(huán)境管理體系運作,確保產(chǎn)品均一性和批間重復性
● IVD產(chǎn)品生產(chǎn)符合ISO13845管理體系標準
● 根據(jù)要求進行cGMP生產(chǎn) 的生產(chǎn)工藝
FastDigest限制性內(nèi)切酶應用視頻:/v_show/id_XMzM3MDAxMTcy.html
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關于賽默飛世爾科技
賽默飛世爾科技(紐約證交所代碼: TMO)是科學服務領域的世界。我們致力于幫助我們的客戶使世界更健康、更清潔、更安全。公司年銷售額接近 110 億美元,擁有員工約37000人。主要客戶類型包括:醫(yī)藥和生物技術公司、醫(yī)院和臨床診斷實驗室、大學、科研院所和政府機構,以及環(huán)境與工業(yè)過程控制行 業(yè)。借助于Thermo Scientific 和 Fisher Scientific 兩個首要品牌,我們將持續(xù)技術創(chuàng)新與的采購方案相結(jié)合,為我們的客戶、股東和員工創(chuàng)造價值。我們的產(chǎn)品和服務有助于加速科學探索的步伐,幫助客戶解 決在分析領域所遇到的各種挑戰(zhàn),無論是復雜的研究項目還是常規(guī)檢測或工業(yè)現(xiàn)場應用。 欲了解更多信息,請瀏覽公司網(wǎng)站: 或 (中文)。
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