土壤幾丁質(zhì)酶（Soil Chitinase，S-Chitinase）試劑盒說明書

微量法 100T/48S

土壤幾丁質(zhì)酶試劑盒-常備現(xiàn)貨

正式測定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定測定意義：

幾丁質(zhì)主要存在于蝦、蟹、昆蟲等甲殼類動(dòng)物的外殼與軟體動(dòng)物的器官(例如烏賊的軟骨)，以及真菌類的細(xì)胞壁中，而幾丁質(zhì)酶(EC 3.2.1.14)可催化幾丁質(zhì)水解，具有抵御真菌侵染的作用，成為抗真菌病害的研究熱點(diǎn)。

測定原理：

幾丁質(zhì)酶水解幾丁質(zhì)產(chǎn)生N-乙酰氨基葡萄糖，進(jìn)一步與對二甲氨基苯甲醛產(chǎn)生紅色化合物，在 585nm處有特征吸收峰，吸光值增加速率反映了幾丁質(zhì)酶的活性。

試劑組成和配制：

自備儀器和用品：

天平、水浴鍋、離心機(jī)、震蕩儀、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板，甲苯、蒸餾水。

樣品處理：

新鮮土樣風(fēng)干，過 30-50 目篩。

測定操作表：

計(jì)算公式：

用微量石英比色皿測定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線：y=5.2714x-0.0007，R²=0.9989；x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（mg/ml），y 為吸光值ΔA。

酶活性定義：37℃條件下，每克土壤每天分解幾丁質(zhì)產(chǎn)生 1μg N-乙酰氨基葡萄糖的酶量為一個(gè)酶活性單位。

土壤幾丁質(zhì)酶活性（μg/d/g 土樣）=（ΔA +0.0007）÷5.2714×V 反總÷W÷T×1000

= 598×（ΔA +0.0007）

V 反總：反應(yīng)體系總體積，0.315ml；W：樣本質(zhì)量，0.1g；T：反應(yīng)時(shí)間，1d；1000：1mg/ml=1000μg/ml

用 96 孔板測定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線：y=2.6357x-0.0007，R²=0.9989；x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（μg/ml），y 為吸光值ΔA。

酶活性定義：37℃條件下，每克土壤每天分解幾丁質(zhì)產(chǎn)生 1μg N-乙酰氨基葡萄糖的酶量為一個(gè)酶活性單位。

土壤幾丁質(zhì)酶活性（μg/d/g 土樣）=（ΔA +0.0007）÷2.6357×V 反總÷W÷T×1000

= 1195×（ΔA +0.0007）

V 反總：反應(yīng)體系總體積，0.315ml；W：樣本質(zhì)量，0.1g；T：反應(yīng)時(shí)間，1d；1000：1mg/ml=1000μg/ml

注意事項(xiàng):

試劑一充分混勻后再使用。

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