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            上海語純生物科技有限公司

            初級會(huì)員·1年

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            CC96301EHA105感受態(tài)
            參考價(jià): 面議
            具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
            • CC96301 產(chǎn)品型號
            • 語純生物 品牌
            • 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
            • 上海市 所在地

            訪問次數(shù):64更新時(shí)間:2025-04-24 10:06:22

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            產(chǎn)品簡介
            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10 ×100ul/100×100ul
            貨號 CC96301 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥
            EHA105感受態(tài)
            產(chǎn)品貨號:CC96301
            產(chǎn)品規(guī)格:10 ×100ul/100×100ul
            本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或進(jìn)一步生產(chǎn)使用,不可用于臨床診斷或治療。
            產(chǎn)品介紹

            EHA105感受態(tài)

            產(chǎn)品簡介
            EHA105 菌株由 EHA101 菌株改造而來,為 C58 型背景,核基因中含有篩選標(biāo)簽——利福平抗性基
            因 Rif,為了便于轉(zhuǎn)化操作,此菌株攜帶一無自身轉(zhuǎn)運(yùn)功能的琥珀堿型 Ti 質(zhì)粒 pEHA105
            (pTiBo542DT-DNA),此質(zhì)粒含有 vir 基因 (vir 基因是 T-DNA 插入植物基因組必需的元件,
            pEHA105 (pTiBo542DT-DNA)質(zhì)粒自身的 T-DNA 轉(zhuǎn)移功能被破壞,但可以幫助轉(zhuǎn)入的雙元載體 T
            DNA 順利轉(zhuǎn)移)。EHA105 菌株適用于水稻、煙草等植物的轉(zhuǎn)基因操作。本公司生產(chǎn)的 EHA105 
            學(xué)轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,經(jīng) pCAMBIA2301 質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率≥10cfu/μg DNA。
            產(chǎn)品組成
            組分 
            化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
            10 × 100 μL
            100 × 100 μL
            定制
            基因型C58 (RifR) Ti pEHA105 (pTiBo542DT-DNA) Succinamopine
            存儲(chǔ)條件
            -80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
            質(zhì)量控制
            除琥珀堿型 Ti 質(zhì)粒 pEHA105 外,無外源質(zhì)粒 DNA 殘留;
            化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥10cfu/μg DNA。
            使用方法
            1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出,在手心融化成冰水混合物,置于冰水浴中;
            2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中,用手撥da管底混勻,依次于冰上靜置 10 分鐘、液
            氮冷凍 分鐘(或干冰乙醇浴和-80 ℃冰凍)、37 ℃水浴 分鐘、冰浴 分鐘;
            3.加入 900 μl 無抗生素的 YEB 液體培養(yǎng)基,于 28℃振蕩培養(yǎng) 2~3 小時(shí);
            4. 6000 rpm 離心一分鐘收菌,留取 100 μl 左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應(yīng)抗生素的 YEB
            平板上,倒置放于 28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng) 2-3 (當(dāng)平板只含有 50 μg/ml Kan 時(shí),28℃培養(yǎng) 48h 即可;平板
            中同時(shí)加入 50 μg/ml Kan,20 μg/ml Rif 時(shí),需 28℃培養(yǎng) 60 h;如果使用的平板含有 50 μg/ml Rif 則需要
            28℃培養(yǎng) 72-90 h
            注意事項(xiàng)
            1. 感受態(tài)細(xì)胞冰浴中解凍后應(yīng)立即使用;
            2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10;
            3. 利福平濃度不應(yīng)高于 25 μg/μl,利福平濃度過高不利于農(nóng)桿菌生長,會(huì)降低其生長速度和轉(zhuǎn)化效率。
            4. 由于 Ti 質(zhì)粒丟失的概率極低(可以忽略),所以相關(guān)抗性基因可以不用添加。

            EHA105感受態(tài)

            EHA105感受態(tài)




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