確定產(chǎn)品消毒后啟用時間，當新產(chǎn)品或原材料、消毒工藝改變可能影響產(chǎn)品理化性能時應予測試。

　　環(huán)氧乙烷消毒后，立即從同一消毒批號的三個大包裝中隨機抽取一定量小包裝樣品，采樣量至少應滿足規(guī)定所需測定次數(shù)的量(留一定量在必要時進行復測用)。

　　分別于環(huán)氧乙烷消毒后24 h及以后每隔數(shù)天進行殘留量測定，直至殘留量降至本標準4.6所規(guī)定的標準值以下。

儀器：氣相色譜儀，氫焰檢測器(FID)。

柱：Chromosorb 101 HP60～80目；玻璃柱長2m，φ 3 mm。柱溫：120℃。

檢測器：150℃。

氣化器：150℃。

載氣量：氮氣：35 mL/min。

氫氣：35 mL/min。

空氣：350 mL/min。

柱前壓約為108 kPa。

D4.1 標準配制

　　用100 mL玻璃針筒從純環(huán)氧乙烷小鋼瓶中抽取環(huán)氧乙烷標準氣(重復放空二次，以排除原有空氣)，塞上橡皮頭，用10 mL針筒抽取上述100 mL針筒中純環(huán)氧乙烷標準氣10 mL，用氮氣稀釋到100 mL(可將10 mL標準氣注入到已有90 mL氮氣的帶橡皮塞頭的針筒中來完成)。用同樣的方法根據(jù)需要再逐級稀釋2～3次(稀釋1 000～10 000倍)，作三個濃度的標準氣體。按環(huán)氧乙烷小鋼瓶中環(huán)氧乙烷的純度、稀釋倍數(shù)和室溫計算出zui后標準氣中的環(huán)氧乙烷濃度。

計算公式如下：

　　k―― 稀釋倍數(shù)；

　　t―― 室溫，℃。

D4.2 樣品處理

　　至少取2個zui小包裝產(chǎn)品，將其剪碎，隨機稱取2 g，放入萃取容器中，加入5 mL去離子水，充分搖勻，放置4h或振蕩30 min待用。如被檢樣品為吸水樹脂材料產(chǎn)品，可適當增加去離子水量，以確保至少可吸出2mL樣液。

D4.3 分析

（標準的附錄）

生產(chǎn)環(huán)境采樣與測試方法

E1.1 樣品采集

　　在動態(tài)下進行。

　　室內面積不超過30 m²，在對角線上設里、中、外三點，里、外點位置距墻1 m；室內面積超過30 m²，設東、西、南、北、中5點，周圍4點距墻1 m。

　　采樣時，將含營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的平板(直徑9 cm)置采樣點(約桌面高度)，打開平皿蓋，使平板在空氣中暴露5 min。

E1.2 細菌培養(yǎng)

　　在采樣前將準備好的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基置35℃±2℃ 培養(yǎng)24 h，取出檢查有無污染，將污染培養(yǎng)基剔除。

　　將已采集的培養(yǎng)基在6 h內送實驗室，于35℃±2℃ 培養(yǎng)48h觀察結果，計數(shù)平板上細菌菌落數(shù)。

E1.3 菌落計算

式中：y₁――空氣中細菌菌落總數(shù)，cfu/m³;

A――平板上平均細菌菌落數(shù)；

S₁――平板面積，cm²;

t--暴露時間，min。

E2.1 樣品采集

　　工作臺：將經(jīng)滅菌的內徑為5cm×5cm的滅菌規(guī)格板放在被檢物體表面，用一浸有滅菌生理鹽水的棉簽在其內涂抹10次，然后剪去手接觸部分棉棒，將棉簽放入含10mL滅菌生理鹽水的采樣管內送檢。

　　工人手：被檢人五指并攏，用一浸濕生理鹽水的棉簽在右手指曲面，從指尖到指端來回涂擦10次，然后剪去手接觸部分棉棒，將棉簽放入含10mL滅菌生理鹽水的采樣管內送檢。

E2.2 細菌菌落總數(shù)檢測

將已采集的樣品在6h內送實驗室，每支采樣管充分混勻后取1mL樣液，放入滅菌平皿內，傾注營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，每個樣品平行接種兩塊平皿，置35℃±2℃ 培養(yǎng)48 h，計數(shù)平板上細菌菌落數(shù)。

式中：y₂――工作臺表面細菌菌落總數(shù)，cfu/cm²;

A――平板上平均細菌菌落數(shù)；

S₂――平板面積，cm²;

y₃--工人手表面細菌菌落總數(shù)，cfu/只手。

E2.3 致病菌檢測

按本標準附錄B進行。

（標準的附錄）

消毒效果生物監(jiān)測評價方法

　　參照GB15981－1995規(guī)定執(zhí)行。

　　成分：

　　制法：除瓊脂外其他成分溶解于蒸餾水中，調pH至7.2～7.4，加入瓊脂，加熱溶解，分裝試管，121℃滅菌15min后備用。

　　成分：

　　制法：將蛋白胨、膽鹽及乳糖溶于水中，校正pH至7.4，加入指示劑，分裝每管50 mL，并放入一個小倒管，115℃滅菌15 min，即得。

　　成分：

　　制法：將蛋白胨及乳糖溶于水中，校正pH至7.4，加入指示劑，分裝每管10 mL，并放入一個小倒管，115℃滅菌15 min，即得。

　　制法：將蛋白胨、磷酸鹽和瓊脂溶解于蒸餾水中，校正pH至7.1，分裝于燒瓶內，121℃滅菌15 min備用，臨用時加入乳糖并加熱溶化瓊脂，冷至55℃，加入伊紅和美藍溶液搖勻，傾注平板。

　　成分：

　　制法：將各種成分混合(如無酪蛋白胨和大豆蛋白胨可用日本多胨代替)，加熱溶解，調pH至7.2～7.3，分裝，121℃滅菌20min，搖勻，避免吐溫80沉于底部，冷至25℃后使用。

　　成分：

　　制法：除瓊脂外，上述各成分混合加熱溶解，調pH至7.4～7.6，然后加入瓊脂，115℃滅菌20 min，冷至55℃左右傾注平皿。

　　成分：

　　制法：將蛋白胨、氯化鎂和硫酸鉀加到蒸餾水中，加熱溶解，調pH至7.4，加入瓊脂和甘油，加熱溶解，分裝試管，115℃滅菌20 min，制成斜面?zhèn)溆谩?/P>

　　成分：

　　制法：各成分加入蒸餾水中浸泡20 min，加熱攪拌溶解，調pH至7.4，5 mL分裝試管中，115℃ 滅菌20 min，直立制成高層備用。

　　成分：

　　制法：將蛋白胨與酵母浸膏加到蒸餾水中，加熱溶解，調pH至7.2，煮沸過濾后補足液量，加入硝酸鉀和亞硝酸鈉溶解均勻，分裝到有小倒管的試管中，115℃滅菌20 min備用。

　　成分：

　　制法：將滅菌后的營養(yǎng)瓊脂加熱溶化，涼至55℃左右，用無菌方法將10 mL脫纖維血加入后搖勻，傾注平皿置冰箱備用。

　　成分：

　　制法：將蛋白胨、氯化鈉、牛肉膏加到蒸餾水中，加熱溶解，調pH至7.4，加入甘露醇和溴麝香草酚藍混勻后，分裝試管，115℃滅菌20 min備用。

　　成分：

　　制法：上述成分溶于蒸餾水中，調pH至7.2～7.4，加熱溶解，分裝試管，121℃滅菌15min后備用。

　　制法：取滅菌3.8％檸檬酸鈉1份，兔全血4份，混勻靜置，3 000 r/min離心5 min，取上清，棄血球。

用700 mL蒸餾水將瓊脂溶解，300 mL蒸餾水將葡萄糖與蛋白胨溶解，混合上述兩部分，搖勻后分裝，115℃滅菌15 min，即得。使用前，用過濾除菌方法加入0.1g/L的氯霉素或者0.03g/L的鏈霉素。

　　定性試驗采用沙氏培養(yǎng)液，即除不加瓊脂外其他成分與制法同上。

G15 營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)液

調節(jié)pH使滅菌后為7.2～7.4，分裝，115℃滅菌30 min，即得。

　　調節(jié)pH至7.0～7.2，加2％溴甲酚紫酒精溶液0.6 mL，115℃ 滅菌30 min，即得。

　　結晶紫染色液：

　　將結晶紫溶解于乙醇中，然后與草酸銨溶液混合。

　　革蘭氏碘液：

　脫色劑

95％乙醇

復染液：

(1)沙黃復染液：

將沙黃溶解于乙醇中，然后用蒸餾水稀釋。

(2)稀石炭酸復紅液

稱取堿性復紅10g，研細，加95％乙醇100mL，放置過夜，濾紙過濾。取該液10mL，加5％石炭酸水溶液90mL混合，即為石炭酸復紅液。再取此液10mL，加水90mL，即為稀石炭酸復紅液。

　　成分：