【概述】
毒物是通常認為毒性較大的物質(zhì)，即使以較小的劑量進入到人體或動物的體內(nèi)便能對機體造成損害，如引起功能障礙、組織損壞，甚至造成死亡。而毒物的概念也具有相對性，對于一個物質(zhì)是有毒還是無毒的判定有一系列的先決條件，不存在任何條件下都無毒或者有毒的物質(zhì)。對于毒性的描述通常可以分為微毒、低毒、中等毒、高毒、劇毒和極毒6個等級。而具有較高毒性等級的物質(zhì)涉及的種類也十分廣泛，比如常見的農(nóng)藥、毒品、安眠鎮(zhèn)靜類藥物、重金屬等[1]。
對毒物的檢驗通常是以化學(xué)分析為基礎(chǔ)，對毒物的種類和含量進行確定，從而為投毒、搶劫等刑事案件的偵破和審理提供依據(jù)和線索。
在司法部頒布的《血液和尿液中108種毒（藥）物的氣相色譜-質(zhì)譜檢驗方法》[2]中，給出了108種常見高毒性物質(zhì)的前處理和單四極桿氣質(zhì)檢測方法。其中涵蓋毒品、精神藥物、農(nóng)藥等類別的物質(zhì)。該檢驗方法中的化合物列表和前處理方式也為本文提供了參考依據(jù)。
【實驗/設(shè)備條件】
氣相色譜方法：
進樣口溫度：270℃，進樣量：1 µL；
進樣方式：不分流進樣，不分流時間：1.5 min；
載氣流速：1.2 mL/min（恒流）；
升溫程序：初始溫度40℃保持1.5 min，以25℃/min升溫到90℃保持1.5 min，以25℃/min升溫到180℃，以5℃/min升溫到280℃，后以10℃/min升溫到300℃，保持8 min；
質(zhì)譜方法：
離子源溫度：300℃；
傳輸線溫度：280℃；
掃描方式：Acquisition-Timed，SRM掃描。
【樣品提取】
【實驗/操作方法】
取加標(biāo)血液或尿液2 mL置于10 mL離心管中，加10%NaOH溶液使檢材呈堿性（pH11-12），用乙 醚3 mL渦旋混合提取約2 min，離心使之分層，轉(zhuǎn)移出乙 醚提取液于5 mL試管中，檢材中再加1 mol/L HCl溶液使呈酸性（pH3-4），用乙 醚3 mL提取殘留液，渦旋混合約2 min，離心使之分層，轉(zhuǎn)移乙 醚層，合并乙 醚提取液，于約60℃水浴中揮發(fā)至近干，殘留物加100 µL乙腈復(fù)溶，待測。
【實驗結(jié)果/結(jié)論】
化合物質(zhì)譜參數(shù)優(yōu)化
三重四極桿氣質(zhì)的優(yōu)點之一就是可以通過二級質(zhì)譜模式采集化合物的離子對信息來有效的排除基質(zhì)中的干擾。而在面對一些新型或者不常見的化合物時，我們往往無法得知該化合物的二級質(zhì)譜參數(shù)信息。TSQ8000-Evo配備AutoSRM軟件可以高度自動化的完成這一優(yōu)化過程。表1中例舉了9種化合物的參數(shù)優(yōu)化結(jié)果（分別在毒品、安眠藥和農(nóng)藥中選擇代表性物質(zhì)）。在實際優(yōu)化的過程中，我們對于部分毒品和精神活性藥物選取了更多了離子對以求在實際分析檢測中得到可信度更高的結(jié)果。
表1. 9種毒物離子對和碰撞能量信息
毒物篩查結(jié)果
選取公安司法毒物檢測中常見的血液和尿液樣本，在其中添加0.05 µg/mL目標(biāo)物，使用前述前處理方法對樣品進行處理?；衔锪斜砣绫?，在儀器方法中，一針進樣同時對列表中的目標(biāo)物進行檢測。在0.05 µg/mL濃度下，尿液和血液中檢出率達到100%。
表2.篩查物質(zhì)列表
定量方法驗證
在毒品中選擇海洛 因、甲基苯丙 胺和氯胺 酮，安眠藥中選擇巴比妥（巴比妥類）、氯丙嗪（吩噻嗪類）、地西 泮和三唑 侖（苯二氮?類），農(nóng)藥中選擇敵敵畏（有機磷類）、甲氰菊 酯（菊酯類）共9種物質(zhì)作為目標(biāo)物，考察其在尿液和血液基質(zhì)中的線性和重現(xiàn)性，結(jié)果見表3。
表3.化合物在不同樣品中的線性和RSD值
復(fù)雜基質(zhì)中SRM的優(yōu)勢
在公安司法領(lǐng)域涉及毒物的案件中，通常需要對尿液和血液進行檢測，而這兩種復(fù)雜的基質(zhì)會對檢測過程產(chǎn)生很大的干擾，造成化合物檢測靈敏度的下降。串接質(zhì)譜的 SRM 模式通過對化合物離子進行二次碎裂可以有效的排除這些干擾。對于 SIM 模式中選擇的碎片離子，通常會在 SRM 模式中作為母離子進行二次碎裂。圖 1 為地西 泮在 SRM 模式下 m/z 221 離子與在 SRM 模式下 m/z 211＞165 和 m/z 211 > 206的響應(yīng)對比，SIM模式中24.95 min目標(biāo)峰峰面積較高，但是在左側(cè)24.87 min有一干擾峰會影響目標(biāo)峰的定量，SRM模式中的離子對均不受影響。在圖2和圖3中，對比了尿液中幾種化合物在SIM模式中碎片離子的信噪比和其對應(yīng)在SRM模式中的高信噪比離子對，SRM模式下的信噪比普遍高于SIM模式。
圖1.地西 泮 m/z 221 離子與 m/z 221＞165 和 m/z 221＞206 離子對對比
圖2. SIM與SRM信噪比對比
圖3. SIM與SRM平均信噪比對比
結(jié)論
本方法使用TSQ 8000 Evo三重四極桿氣質(zhì)配合AutoSRM軟件對未知化合物的離子對和碰撞能信息進行優(yōu)化，得到100種毒物的質(zhì)譜方法信息。同時，參考《血液和尿液中108種毒（藥）物的氣相色譜-質(zhì)譜檢驗方法》對樣本進行前處理，進行篩查試驗，在0.05 µg/mL濃度下檢出率97%，在1.5 µg/mL濃度下檢出率100%。對9種代表性化合物進行線性和重現(xiàn)性的測試，線性回歸系數(shù)R2> 0.9980，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD < 7.3。
【儀器/耗材清單】
質(zhì)譜儀：Thermo ScienticTMTSQTM8000 Evo；
氣相色譜儀：Thermo ScienticTMTraceTM1300 GC配AI1310自動進樣器；
色譜柱：Thermo ScienticTMTraceGOLD TG-5MS 30 m*0.25 mm * 0.25 µm；
【參考文獻】
[1]苗翠英，楊瑞琴.《毒物毒品檢驗》.中國人民公安大學(xué)出版社. 2013:1
[2] SF/Z JD0107014—2015《血液和尿液中108種毒（藥）物的氣相色譜-質(zhì)譜檢驗方法》
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