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液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)揭示“酸湯子殺人案”中的神秘真兇

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事件背景

10月5日，黑龍江省雞西市雞東縣興農(nóng)鎮(zhèn)某社區(qū)居民王某及其親屬9人在家中聚餐，疑似食物中毒致8人死亡，幸存者也于19日不治身亡。調(diào)查得知，其間9人共同食用了自制酸湯子。該酸湯子食材已在冰箱冷凍一年，疑似該食材引發(fā)食物中毒。經(jīng)醫(yī)院化驗(yàn)檢測(cè)，食物中黃曲霉素嚴(yán)重超標(biāo)，初步判定為黃曲霉毒素中毒。

案情分析

曝光

時(shí)間曝光后迅速引起社會(huì)的廣泛關(guān)注并登上新聞熱搜。但是小編朋友圈里的很多從事食品安全的資深用戶(hù)均第一時(shí)間轉(zhuǎn)發(fā)并發(fā)表了自己的一些猜想——事件真相可能不是黃曲霉毒素中毒。我們所熟知的黃曲霉素，作一種天然的、致癌證據(jù)非常充分的強(qiáng)致癌物，一般污染玉米、花生、高粱、小麥、大米等，要造成這么高死亡率的急性中毒，可能性非常小。然而在專(zhuān)家們的分析下，新的矛頭指向了另外一種高致命性毒素——“椰毒假單胞菌”發(fā)酵產(chǎn)生的米酵菌酸毒素。

印證

案件發(fā)生后，黑龍江省衛(wèi)生健康委員會(huì)12日發(fā)布的新信息，雞西食物中毒事件經(jīng)流行病學(xué)調(diào)查和疾控中心采樣檢測(cè)后，在玉米面以及患者胃液中檢出高濃度米酵菌酸，由此印證了這是一場(chǎng)由椰毒假單胞菌污染產(chǎn)生米酵菌酸引起的食物中毒事件。

揭秘真兇

其實(shí)早在8月1日，廣東省市場(chǎng)監(jiān)督管理局公眾號(hào)發(fā)布文章《廣東省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布消費(fèi)提醒：慎防米酵菌酸毒素中毒》。進(jìn)入高溫潮濕天氣，河粉、腸粉（卷粉）、陳村粉、粿條、等濕米粉容易受椰毒假單胞菌污染而產(chǎn)生米酵菌酸毒素。椰毒假單胞菌在自然界普遍存在，若米面食品未及時(shí)冷藏保存或超過(guò)保質(zhì)期，食用引發(fā)米酵菌酸毒素中毒的風(fēng)險(xiǎn)增大。

米酵菌酸（Bongkrek acid）

米酵菌酸（Bongkrek acid）是一種結(jié)構(gòu)含有三個(gè)羧基的長(zhǎng)鏈羧酸?？茖W(xué)家在2019年發(fā)現(xiàn)了米酵菌酸能與ADP/ATP轉(zhuǎn)運(yùn)酶結(jié)構(gòu)中的受質(zhì)結(jié)合處結(jié)合，使得粒線體基質(zhì)內(nèi)的ATP無(wú)法與轉(zhuǎn)運(yùn)酶結(jié)合而無(wú)法離開(kāi)線粒體，進(jìn)而導(dǎo)致無(wú)法給細(xì)胞供能。目前該毒素中毒尚無(wú)*解毒藥物，致死率為40-100%。以下就是殺手的真面目：

 Fig.1 米酵菌酸與異構(gòu)體異米酵菌酸結(jié)構(gòu)式

椰毒假單胞菌培養(yǎng)菌落

但是再隱蔽地“作案”都蒙騙不了質(zhì)譜分析的“法眼”。賽默飛Orbitrap™系列超高分辨率液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)具有出色的分辨率、質(zhì)量精度、靈敏度及穩(wěn)定性，可以實(shí)現(xiàn)一針進(jìn)樣獲得樣品中所有化合物的高質(zhì)量精度一級(jí)/二級(jí)質(zhì)譜數(shù)據(jù)，為高通量毒物篩查提供可靠準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)；結(jié)合一系列數(shù)據(jù)庫(kù)與數(shù)據(jù)處理軟件，能實(shí)現(xiàn)靈活簡(jiǎn)單的一站式篩查流程。以下分享來(lái)自用戶(hù)的案例：

米面類(lèi)基質(zhì)樣品采用目前較為成熟的QuEChERS快速高效凈化法對(duì)化合物進(jìn)行提取凈化，可以有效地去除樣品中脂質(zhì)，蛋白質(zhì)等成分，再氮吹復(fù)溶濃縮后即可上機(jī)進(jìn)行LC-HRMS快速篩查分析。賽默飛基于的 Core Enhanced Technology（表面多孔增強(qiáng)核技術(shù)）結(jié)合固定相鍵合，以及耐受 100% 水柱填料特性， Thermo Scienti­fic™ Accucore aQ HPLC 色譜柱能夠提供高效分析真菌毒素類(lèi) 、有機(jī)酸類(lèi)化合物的色譜解決方案，顯著提升實(shí)驗(yàn)室工作效率。

 在乙腈-0.1%（v/v）甲酸水溶液的LC-HRMS條件下米酵菌酸分析色譜圖（50 μg/L）如下：

使用Full Scan – ddMS2采集模式能同時(shí)獲取化合物一級(jí)、二級(jí)信息；亞PPM級(jí)質(zhì)量精度保證定性結(jié)果準(zhǔn)確性。

方法學(xué)考察結(jié)果如下表格，方法回收率為90.6-96.8%。方法特異性好，靈敏度高，分析速度快。 

Note

面對(duì)日益復(fù)雜的食品安全問(wèn)題，賽默飛色譜與質(zhì)譜產(chǎn)品能夠提供全面的霉菌毒素解決方案及數(shù)據(jù)庫(kù)，涵蓋黃曲霉毒素、嘔吐毒素、雪腐鐮刀菌烯醇、伏馬毒素等常見(jiàn)毒物。此外，基于液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)的農(nóng)獸藥殘留、司法毒物、非法添加物等檢測(cè)解決方案也正攜手用戶(hù)，守護(hù)人類(lèi)生命健康。

參考文獻(xiàn)：

[1]梁明等. QuEChERS EMR-Lipid 結(jié)合超高效液相 色譜-四極桿/靜電場(chǎng)軌道阱高分辨質(zhì)譜快速測(cè)定河粉中的米酵菌酸. 《2019 年廣東省食品學(xué)會(huì)年會(huì)論文集》,2019.58-63. 

[2] 曾雪芳,  劉嘉飛,  王立亞,等.  超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定米粉和河粉中的米酵菌酸[J].  食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào), 2019, 10(13): 4074-4079. 

[3] Nadine Moebius, et al. Identification of the potent toxin bongkrekic acid in a traditional African beverage linked to a fatal outbreak[J]. Forensic Science International,2016. 

[4] GB  5009.189-2016.食品安全標(biāo)準(zhǔn)  食品中米酵菌酸的測(cè)定[S].

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