賽默飛高效液相色譜是基于高效液相色譜法的理論及原理，涵蓋了小顆粒填料、非常低系統(tǒng)體積及快速檢測手段等全新技術(shù)，增加了分析的通量、靈敏度及色譜峰容量。主要用于各種藥物及其制劑的分析測定，尤其是生物樣品、中藥等復(fù)雜體系的成分的分離分析，可對物質(zhì)進(jìn)行定量定性分析。超高效液相色譜儀的速度、靈敏度及分離度分別是傳統(tǒng)的高效液相色譜儀的9倍、3倍及1.7倍，它縮短了分析時(shí)間，同時(shí)減少了溶劑用量降低了分析成本。
賽默飛高效液相色譜的操作步驟：
1、過濾流動(dòng)相，根據(jù)需要選擇不同的濾膜（0.45um）。
2、對抽濾后的流動(dòng)相進(jìn)行超聲脫氣10-20分鐘。
3、打開HPLC工作站，連接好流動(dòng)相管道，連接檢測系統(tǒng)。
4、進(jìn)入HPLC控制界面主菜單，點(diǎn)擊manual，進(jìn)入手動(dòng)菜單。
5、有一段時(shí)間沒用，或者換了新的流動(dòng)相，需要先沖洗泵和進(jìn)樣閥。沖洗泵，直接在泵的出水口，用針頭抽取。沖洗進(jìn)樣閥，需要在manual菜單下，先點(diǎn)擊purge，再點(diǎn)擊start，沖洗時(shí)速度不要超過10ml/min。
6、調(diào)節(jié)流量，初次使用新的流動(dòng)相，可以先試一下壓力，流速越大，壓力越大，一般不要超過2000。點(diǎn)擊injure，選用合適的流速，點(diǎn)擊on，走基線，觀察基線的情況。
7、設(shè)計(jì)走樣方法。點(diǎn)擊file，選取select users and methods，可以選取現(xiàn)有的各種走樣方法。若需建立一個(gè)新的方法，點(diǎn)擊new method。選取需要的配件，包括進(jìn)樣閥，泵，檢測器等，根據(jù)需要而不同。選完后，點(diǎn)擊protocol。一個(gè)完整的走樣方法需要包括：
①、進(jìn)樣前的穩(wěn)流，一般2-5分鐘；
②、基線歸零；
?、?、進(jìn)樣閥的loading-inject轉(zhuǎn)換；
?、堋⒆邩訒r(shí)間，隨不同的樣品而不同。
8、進(jìn)樣和進(jìn)樣后操作。選定走樣方法，點(diǎn)擊start。進(jìn)樣，所有的樣品均需過濾。方法走完后，點(diǎn)擊postrun，可記錄數(shù)據(jù)和做標(biāo)記等。全部樣品走完后，再用上面的方法走一段基線，洗掉剩余物。
9、關(guān)機(jī)時(shí)，先關(guān)計(jì)算機(jī)，再關(guān)液相色譜。
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