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植物生長調(diào)節(jié)劑

小朋友在長身體的時(shí)候，在合理飲食之外需要補(bǔ)充一些營養(yǎng)劑，植物也一樣，需要生長調(diào)節(jié)劑，才能結(jié)出色香味俱全的果實(shí)。以蕓苔素內(nèi)酯為例，作為第六代植物生長調(diào)節(jié)劑，其通過適宜濃度浸種和莖葉噴施處理，可以促進(jìn)蔬菜、瓜類、水果等作物生長，可改善作物品質(zhì)，提高作物產(chǎn)量，使作物色澤艷麗、葉片更厚實(shí)，也能使茶葉的采葉時(shí)間提前、瓜果含糖份更高、個(gè)體更大、產(chǎn)量更高、更耐儲藏。

雖然近期的科學(xué)研究已證明，植物生長調(diào)節(jié)劑主要只對植物有用，對動物或人體的副作用遠(yuǎn)低于其他農(nóng)藥，但依然需要對其質(zhì)量進(jìn)行嚴(yán)格控制并合理應(yīng)用，以防止過量施用造成嚴(yán)重殘留，對農(nóng)作物未來的生產(chǎn)計(jì)劃帶來影響。2023年9月21日，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部辦公廳發(fā)布了關(guān)于切實(shí)加強(qiáng)當(dāng)前農(nóng)藥監(jiān)督管理工作的通知，強(qiáng)化農(nóng)藥安全風(fēng)險(xiǎn)防范。2024年7月26日藥典委公示了植物生長調(diào)節(jié)劑殘留量的測定方法標(biāo)準(zhǔn)草案，采用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用對59種植物生長調(diào)節(jié)劑進(jìn)行檢測和控制，相關(guān)細(xì)節(jié)可以參考賽默飛近期發(fā)布的應(yīng)用方案。

而對于純度和濃度更高的原料控制，則可選擇更加簡便易行的檢測方法。目前合成的廣泛應(yīng)用的蕓苔素內(nèi)酯主要有4種，分別是24-表蕓苔素內(nèi)酯、22,23,24-表蕓苔素內(nèi)酯、28-表高蕓苔素內(nèi)酯和28-表蕓苔素內(nèi)酯，其中24-表蕓苔素內(nèi)酯目前最為常用，由于該類化合物結(jié)構(gòu)中沒有明顯的紫外發(fā)色團(tuán)，所以采用紫外檢測器檢測困難，目前檢測方法有苯硼酸衍生后用液相色譜測定和液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定其含量。行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)方法HG/T 4922-2016采用苯硼酸衍生后，以紫外檢測器在222nm波長進(jìn)行測定，該方法干擾峰較多，而且前處理復(fù)雜耗時(shí)。

圖1 蕓苔素內(nèi)酯類化合物結(jié)構(gòu)

本文采用Acclaim polar advantage Ⅱ色譜柱，結(jié)合電霧式檢測器（CAD）測定農(nóng)藥中24-表蕓苔素內(nèi)酯含量，該方法不需要衍生，靈敏度高，通用性強(qiáng)，非常適用于該類物質(zhì)的檢測。

儀器配置

Thermo Fisher Vanquish高效液相色譜儀，基座:Vanquish System Base，泵：Vanquish Core Quaternary Pump（VC-P21-A），自動進(jìn)樣器：Split Sampler CT（VC-A13-A），柱溫箱：Vanquish Column Compartment C（VC-C10-A），檢測器：Charged Aerosol Detector H（VH-D20-A），色譜軟件：變色龍Chromeleon 7.3。

圖2  配置CAD檢測器的Vanquish液相色譜儀

測定方法

色譜條件

色譜柱：Acclaim PolarAdvantage Ⅱ (150 mm×4.6 mm，5μm，P/N 063197)，流動相：水 : 乙腈 = 60：40。流速1.0mL/min，進(jìn)樣體積15 µL，柱溫25 °C（still air）；檢測器采集頻率10Hz，過濾常數(shù)5s，蒸發(fā)溫度35℃。

對照品和供試品溶液測定譜圖

對照品溶液和供試品溶液分別進(jìn)樣分析，液相色譜測定結(jié)果見圖3-4。

圖3 對照品溶液測定譜圖

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圖4 供試品溶液測定譜圖

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測定結(jié)果

方法線性、精密度和準(zhǔn)確度結(jié)果

配制不同濃度的工作曲線對照品溶液，注入高效液相色譜儀進(jìn)行分析，以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，考察方法的線性。結(jié)果顯示，在5.76到92.16µg/mL濃度范圍內(nèi)一次線性良好，標(biāo)準(zhǔn)曲線Y=0.0565x + 0.1234，相關(guān)系數(shù)R = 0.999。

蕓苔素內(nèi)酯可溶液劑含量測定結(jié)果

實(shí)驗(yàn)所用樣品為24-表蕓苔素內(nèi)酯可溶液劑（標(biāo)示含24-表蕓苔素內(nèi)酯0.01%），取該樣品11g置25mL量瓶中，甲醇溶解并定容至刻度，后經(jīng)0.22μm PTFE濾膜過濾，作為供試品溶液上機(jī)測定。并與苯硼酸衍生方法測定結(jié)果進(jìn)行比對，結(jié)果基本一致，偏差小于2.0%。

表1 樣品測定結(jié)果

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總  結(jié)

蕓苔素內(nèi)酯類化合物24-表蕓苔素內(nèi)酯、22,23,24-表蕓苔素內(nèi)酯、28-表高蕓苔素內(nèi)酯和28-表蕓苔素內(nèi)酯，均可采用本方法進(jìn)行測定。CAD作為通用性檢測器適合于該類需要衍生后測定的化合物，并且簡單、快速、靈敏度高，對農(nóng)藥和農(nóng)產(chǎn)品中蕓苔素類化合物的分析有較強(qiáng)參考意義。

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