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分光光度計(jì)的顯色反應(yīng)
分光光度計(jì)采用一個(gè)可以產(chǎn)生多個(gè)波長(zhǎng)的光源，通過系列分光裝置，從而產(chǎn)生特定波長(zhǎng)的光源，光源透過測(cè)試的樣品后，部分光源被吸收，計(jì)算樣品的吸光值，從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。常用于核酸，蛋白定量以及細(xì)菌生長(zhǎng)濃度的定量。
分光光度計(jì)的顯色反應(yīng)一般要求影響顯色反應(yīng)因素選擇性好、靈敏度高，生成的有色化合物性質(zhì)穩(wěn)定，顯色劑與有色物顏色反差大，顯色反應(yīng)要易于控制顯色劑用量、反應(yīng)液的酸堿度(pH)、反應(yīng)溫度、顯色反應(yīng)時(shí)間干擾離子的影響。
1、顯色反應(yīng)一般要求
(1)選擇性好：顯色劑只與一種被測(cè)組分起顯色反應(yīng);
(2)靈敏度高：靈敏度高有笪微量組分的測(cè)定;
(3)有色化合物性質(zhì)穩(wěn)定：確保前后測(cè)定準(zhǔn)確.
(4)顯色劑與有色物顏色反差大：兩者zui大吸收波長(zhǎng)之差應(yīng)大于60nm;
(5)顯色反應(yīng)要易于控制：結(jié)果的確保實(shí)驗(yàn)再現(xiàn)性.
2、影響顯色反應(yīng)的主要因素
(1)顯色劑用量：通過實(shí)驗(yàn)來確定zui適用量;
(2)反應(yīng)液的酸堿度(pH)：溶液酸堿度直接影響金屬離子與顯色劑存在形式以及有色化合物組成的穩(wěn)定性.
(3)反應(yīng)溫度：不同的顯色反應(yīng)需要不同的反應(yīng)溫度,一般顯色反應(yīng)可在室溫下完成.
(4)顯色反應(yīng)時(shí)間：顯色反應(yīng)的速度有快有慢.
(5)干擾離子的影響：應(yīng)采用適當(dāng)方法消除其影響.
實(shí)驗(yàn)室分光光度計(jì)是利用分光光度法，通過測(cè)定被測(cè)物質(zhì)在特定波長(zhǎng)處或一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)光的吸收度，對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析。
不同種類的分光光度計(jì)的基本原理相似，都是利用一個(gè)可以產(chǎn)生多個(gè)波長(zhǎng)的光源，通過系列分光裝置，從而產(chǎn)生特定波長(zhǎng)的光源。光源透過測(cè)試的樣品后，部分光源被吸收，通過測(cè)量樣品的吸光值，經(jīng)過計(jì)算可以轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
分光光度計(jì)采用一個(gè)可以產(chǎn)生多個(gè)波長(zhǎng)的光源，通過系列分光裝置，從而產(chǎn)生特定波長(zhǎng)的光源，光源透過測(cè)試的樣品后，部分光源被吸收，計(jì)算樣品的吸光值，從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。