醫(yī)療器械環(huán)氧乙烷殘留量的測試方法（氣相色譜法） 

2020年肺炎爆發(fā)，佩戴口罩能有效阻止飛沫的傳播、阻斷病毒傳染路線，此時口罩成為了抗擊疫情的有力防線。合格的口罩必須要在無菌環(huán)境中生產(chǎn)，生產(chǎn)過程中一般會選擇使用環(huán)氧乙烷（EO）進(jìn)行滅。

 環(huán)氧乙烷(EO)是一種廣譜低溫滅菌劑，可在常溫下殺滅各種微生物，包括芽孢、結(jié)核桿菌、細(xì)菌、病毒、真菌等。同時 EO 穿透性很強，可以穿透微孔達(dá)到產(chǎn)品內(nèi)部相應(yīng)的深度，從而大大提高滅菌效果。然而在殺滅微生物的同時，殘留在口罩中的環(huán)氧乙烷會對使用者的身體產(chǎn)生一定程度的傷害。環(huán)氧乙烷不僅具有急性毒性，還具有致過敏性、致突變和致癌作用，對體內(nèi)器官系統(tǒng)造成損傷。所以檢測醫(yī)用口罩中環(huán)氧乙烷殘留尤為重要。

環(huán)氧乙烷殘留量檢測意義：

環(huán)氧乙烷是一種有機化合物，為一種環(huán)醚，化學(xué)式是C2H4O，是一種有毒的致癌物質(zhì)。環(huán)氧乙烷具有頑強的擴散和穿透能力，對細(xì)菌芽孢、真菌和病毒等各種微生物均有滅殺作用，屬于廣譜滅菌劑，現(xiàn)在被廣泛的應(yīng)用于洗滌，制藥，印染等行業(yè)消毒使用。

環(huán)氧乙烷滅菌裝置是一次性使用無菌醫(yī)療器械生產(chǎn)企業(yè)的關(guān)鍵設(shè)備，安裝操作、使用管理有其特殊要求，使用環(huán)氧乙烷做滅菌劑，可在常溫下殺滅各種微生物，包括芽孢、結(jié)核桿菌、細(xì)菌、病毒、真菌等。但因環(huán)氧乙烷本身是有毒的致癌物質(zhì)，對人體毒性傷害非常大，所以醫(yī)療器械行業(yè)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)對一次性使用無菌醫(yī)療器械產(chǎn)品的環(huán)氧乙烷殘留量指標(biāo)有著嚴(yán)格要求。

環(huán)氧乙烷殘留量檢測執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)：

GB/T 14233.1-2008 醫(yī)用輸液、輸血、注射器具檢驗方法 第1部分：化學(xué)分析方法

GB/T 16886.7-2001 醫(yī)療器械生物學(xué)評價 第7部分：環(huán)氧乙烷滅菌殘留量

 GB 19083-2010《醫(yī)用防護口罩技術(shù)要求》、

YY/T 0469-2011《醫(yī)用外科口罩》、

YY/T 0969-2013《一次性使用醫(yī)用口罩》規(guī)定的醫(yī)用口罩中環(huán)氧乙烷殘留檢測方法

環(huán)氧乙烷殘留量檢測方法—氣相色譜法：

1. 試驗設(shè)備：氣相色譜儀

2. 測試原理：在一定溫度下，用萃取劑－水萃取樣品中所含環(huán)氧乙烷（EO），用頂空氣相色譜法測定環(huán)氧乙烷含量。

3. 標(biāo)準(zhǔn)貯備液制備方法（稱重法）：

取外部干燥的50ml容量瓶，加水約30ml，加瓶塞，稱重，精確到0.1mg。用注射器注入約0.6ml環(huán)氧乙烷，不加瓶塞，輕輕搖勻，蓋好瓶塞，稱重，前后兩次稱重之差，即為溶液中所含環(huán)氧乙烷的重量。加水至刻度再將此溶液稀釋成1× 10-2g/L作為標(biāo)準(zhǔn)貯備液。

4. 測試方法：

4.1 取環(huán)氧乙烷標(biāo)準(zhǔn)品適量，制成六個濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，各取10ml，制備六個濃度的標(biāo)準(zhǔn)品試樣。

4.2 當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)品試樣達(dá)到氣液平衡時，不同濃度的液體對應(yīng)于不同濃度的氣體，取平衡后的氣體，注入進(jìn)樣器，記錄環(huán)氧乙烷的峰高（或面積）。

4.3 根據(jù)不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液對應(yīng)的峰高（或面積） ，繪制峰高（或面積） －濃1.5 根據(jù)公式，計算出環(huán)氧乙烷殘留量。

5、氣相色譜儀條件

儀器配置：

    氣相色譜儀 GC-9280

    頂空進(jìn)樣器 AHS-628

可選用色譜柱：

    毛細(xì)管柱Ⅰ  

          型號：OV-1301    

          規(guī)格：30m×0.53mm×2.0um  

          貨號：C363053200

     毛細(xì)管柱Ⅱ  

          型號：PEG-20M   

          規(guī)格：30m×0.32mm×0.5um  

          貨號：C413032050

     毛細(xì)管柱Ⅲ   

          型號：SE-54      

          規(guī)格：30m×0.32mm×0.5um  

          貨號：C223032050

6、儀器條件：

    柱溫箱升溫程序：

    40℃保持1min，15℃/min升溫至130℃，保持3min

    氣化室：250℃

    檢測室：FID，250℃

    載   氣：氮氣

    頂空條件：

    平衡溫度：80℃

    閥、定量環(huán)溫度：90℃

    傳輸線溫度：100℃

    平衡時間：30min

7、實驗步驟

7.1、 干擾因素測定（空白）

1）空氣中干擾因素

      進(jìn)樣器從空氣中取樣，注入進(jìn)樣室，記錄相關(guān)雜質(zhì)。

2）水中干擾因素

     精確量取5mL水，置20mL頂空瓶中，密封，放頂空進(jìn)樣器中平衡。

     用進(jìn)樣器從平衡后的水樣中迅速取上部氣體，注入進(jìn)樣室，記錄相關(guān)雜質(zhì)。

     盡可能排除干擾因素，進(jìn)行下一步操作。

7.2、環(huán)氧乙烷標(biāo)準(zhǔn)貯備液配制

     取外部干燥的50mL容量瓶，加入約30mL水，加瓶塞，精確稱重。用注射器注入約0.6mL環(huán)氧乙烷，不加瓶塞，輕輕搖勻，蓋好瓶塞，稱重，前后兩次稱重之差，即為溶液中所含環(huán)氧乙烷重量，約0.5g。加水至刻度制成約含環(huán)氧乙烷10mg/mL的溶液，作為標(biāo)準(zhǔn)貯備液。

7.3、 環(huán)氧乙烷位置確定

     從標(biāo)準(zhǔn)貯備液中精確量取5mL，置20mL頂空瓶中，密封，放頂空進(jìn)樣器中平衡。

     用進(jìn)樣器從平衡后的標(biāo)準(zhǔn)貯備液樣中迅速取上部氣體，注入進(jìn)樣室，記錄環(huán)氧乙烷的位置。

7.4、 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線

     用貯備液制1μg/mL~10μg/mL六個系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液。精確量取5mL，置20mL頂空瓶中，密封，放頂空進(jìn)樣器中平衡。

     用進(jìn)樣器依次從平衡后的標(biāo)準(zhǔn)樣中迅速取上部氣體，注入進(jìn)樣室，記錄環(huán)氧乙烷的峰高（或峰面積）。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線（X:EO濃度，μg/mL；Y:峰高或峰面積）

7.5、供試液制備

     取產(chǎn)品上與人體接觸的EO相對殘留含量最高的部件進(jìn)行試驗，截為5mm長碎塊（或10mm2片狀物），取1.0g放入20mL頂空瓶中，精密加水5mL水，密封，放頂空進(jìn)樣器中平衡。

7.6、實驗樣品的測量

     用進(jìn)樣器依次從平衡后的標(biāo)準(zhǔn)樣中迅速取上部氣體，注入進(jìn)樣室，記錄環(huán)氧乙烷的峰高（或峰面積）。

     根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出樣品相應(yīng)的濃度。 

8、結(jié)果計算

    計算樣品中環(huán)氧乙烷相對含量：

CEO=5c/m

    式中：

    CEO—產(chǎn)品中環(huán)氧乙烷相對含量，單位為微克每克（μg/g）；

    5 —量取的浸提液體積，單位為毫升（mL） ；

   c —標(biāo)準(zhǔn)曲線上找出的供試液相應(yīng)的濃度，單位為微克每毫升（μg/mL）；

    m —稱樣量，單位為克（g）

9、實驗結(jié)果

    采用：毛細(xì)管柱Ⅰ（型號：PEG-20M） 不同濃度（6點）標(biāo)準(zhǔn)品測試圖如下：

濃度1：1μg/mL

濃度2：2μg/mL

濃度3：3μg/mL

濃度4：4μg/mL

濃度5：9μg/mL

濃度6：10μg/mL