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            上海乾思生物科技有限公司
            中級(jí)會(huì)員 | 第17年

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            RACE|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)

            時(shí)間:2015/6/2閱讀:429
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            關(guān)鍵詞:RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)
            簡(jiǎn)介:世界*品牌RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)原裝,質(zhì)量保證,*。
            RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)——pCzn1質(zhì)粒+Arctic Express宿主菌低溫表達(dá)體系。
            我們具備豐富的蛋白表達(dá)設(shè)計(jì)經(jīng)驗(yàn)及實(shí)驗(yàn)操作技巧,承諾客戶不成功不收費(fèi)。在獲得重組蛋白產(chǎn)品的同時(shí),我們也會(huì)提供相應(yīng)的原始數(shù)據(jù)和原始圖片,不需要再額外花費(fèi)精力重復(fù)實(shí)驗(yàn)。另一方面,我們所有的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)真實(shí)可信,我們提供原始的表達(dá)菌株和克隆質(zhì)粒,客戶可以依據(jù)我們的實(shí)驗(yàn)報(bào)告重復(fù)我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
            產(chǎn)品品牌:RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)   http://www.。。com/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html    
            測(cè)序?qū)嶒?yàn)流程:
             cDNA末端快速擴(kuò)增技術(shù)(rapid amplification of cDNA ends,RACE)是一種基于RT-PCR,在僅知目標(biāo)基因部分表達(dá)片段的基礎(chǔ)上,從低豐度的轉(zhuǎn)錄本中快速擴(kuò)增其cDNA的5’和3’末端的有效方法,以其簡(jiǎn)單、快速、廉價(jià)等優(yōu)勢(shì)而受到越來越多的重視。RACE實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵在于高質(zhì)量與完整性好的RNA以及特異性強(qiáng)的引物。我們采用國(guó)內(nèi)目前應(yīng)用zui廣的SMARTerTM RACE cDNA Amplification Kit(CLONTECH)進(jìn)行cDNA的5’和3’末端片段克隆。  zui終,從2個(gè)有相互重疊序列的5’和3’-RACE產(chǎn)物中獲得全長(zhǎng)cDNA;或者通過分析RACE產(chǎn)物的5’和3’端序列,合成相應(yīng)引物擴(kuò)增出全長(zhǎng)cDNA。
            與篩庫(kù)法相比較,有許多方面的優(yōu)點(diǎn)
            1)此方法是通過PCR技術(shù)實(shí)現(xiàn)的,無須建立cDNA文庫(kù),可以在很短的時(shí)間內(nèi)獲得有利用價(jià)值的信息。
            2)節(jié)約了實(shí)驗(yàn)所花費(fèi)的經(jīng)費(fèi)和時(shí)間。
            3)只要引物設(shè)計(jì)正確,在初級(jí)產(chǎn)物的基礎(chǔ)上可以獲得大量的感興趣基因的全長(zhǎng)。
            實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有的RACE試劑盒的簡(jiǎn)介
            ??RACE是一種從一個(gè)相同的cDNA模板進(jìn)行5‘和3‘末端快速克隆的方法。此方法會(huì)產(chǎn)生較少的錯(cuò)誤條帶。此過程中使用的酶混合物非常適合長(zhǎng)鏈PCR。
            ??使用此方法的要求是必須知道至少23-28個(gè)核苷酸序列信息,以此來設(shè)計(jì)5’末端和3‘末端RACE反應(yīng)的基因特異性引物(GSPs)。
            RACE引物的設(shè)計(jì):
            基因特異性引物(GSPs)應(yīng)該是:
            ??23-28nt
            ??50-70%GC
            ??Tm值≥65度,Tm值≥70度可以獲得好的結(jié)果
            需要實(shí)驗(yàn)者根據(jù)已有的基因序列設(shè)計(jì)5‘和3‘RACE反應(yīng)的基因特異性引物(GSP1和GSP2).由于兩個(gè)引物的存在,PCR的產(chǎn)物是特異性的。

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