| 供貨周期 |
一個月 |
應用領域 |
化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
人熱休克因子1試劑盒借 ELISA 原理，精準測 HSF1 含量。操作規(guī)范，用于腫瘤、神經(jīng)及心血管研究，助機制探究與診療，優(yōu)勢突出。
人熱休克因子1試劑盒
人熱休克因子1試劑盒是生物醫(yī)學研究與臨床檢測中，用于精準測定人體樣本中人熱休克因子 1（HSF1）含量的關(guān)鍵工具。HSF1 作為一種重要的轉(zhuǎn)錄因子，在細胞應對熱應激、氧化應激、化學毒物刺激等多種應激反應中扮演核心角色。當細胞受到外界刺激時，HSF1 被激活，進而調(diào)控一系列熱休克蛋白基因的表達，對維持細胞內(nèi)蛋白質(zhì)穩(wěn)態(tài)、促進細胞存活及修復損傷起到關(guān)鍵作用。準確檢測 HSF1 含量，對于深入探究細胞應激機制、疾病發(fā)生發(fā)展過程以及評估治療效果具有重要意義。
該試劑盒基于經(jīng)典的酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）原理構(gòu)建。試劑盒內(nèi)的酶標板預先包被有針對人 HSF1 的高特異性抗體。當含有 HSF1 的樣本，如細胞裂解液、組織勻漿、血清或血漿等加入酶標板孔中時，樣本里的 HSF1 抗原會迅速與包被抗體特異性結(jié)合，形成抗原 - 抗體復合物。隨后加入酶標記的另一種針對 HSF1 的抗體，該抗體能夠識別已結(jié)合在包被抗體上的 HSF1，進而構(gòu)建起穩(wěn)定的抗體 - 抗原 - 酶標抗體復合物。加入酶的底物后，在酶的催化作用下，底物發(fā)生顯色反應，顏色的深淺與樣本中 HSF1 的含量呈正相關(guān)。通過酶標儀在特定波長下測定吸光度，并與試劑盒所提供的標準曲線比對，即可精確計算出樣本中 HSF1 的含量。
在操作流程方面，規(guī)范采集樣本是首要步驟。以細胞裂解液樣本制備為例，需嚴格遵循細胞培養(yǎng)及裂解的標準操作規(guī)程。培養(yǎng)細胞時要保證細胞處于良好的生長狀態(tài)，收集細胞后，使用合適的裂解液在冰上充分裂解細胞，確保 HSF1 充分釋放且不被降解。從冷藏環(huán)境取出試劑盒后，需將其置于室溫環(huán)境平衡一段時間，使試劑盒各組分達到適宜的反應溫度。嚴格按照說明書，精確吸取適量樣本、不同濃度梯度的標準品以及空白對照，分別加入酶標板相應孔中。加入酶標抗體后，輕輕振蕩使反應體系充分混勻，然后將酶標板放入 37℃恒溫孵育箱中，孵育特定時間，確?？乖贵w反應充分進行。孵育結(jié)束，用洗滌緩沖液多次洗滌酶標板，徹di清除未結(jié)合的多余物質(zhì)，降低非特異性干擾。緊接著加入底物溶液，在避光條件下進行顯色反應，在規(guī)定時間內(nèi)迅速用酶標儀讀取各孔吸光度數(shù)值，依據(jù)標準曲線確定樣本中 HSF1 的濃度。
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