色譜柱的物理性質(zhì)、化學性質(zhì)介紹

閱讀：2693發(fā)布時間：2022-5-17

　　色譜柱的選擇直接影響了液相色譜分析中分離效果的好壞，選擇合適的色譜柱可以縮短方法開發(fā)所需的時間，并且使方法更具穩(wěn)定性。

　　根據(jù)色譜柱的參數(shù)可以給我們提供一個初步的選擇，但由于各個儀器廠商的填料技術和鍵合技術都有差異。即使都是C18柱，不同品牌、同一品牌不同系列都有不同的功能，有能耐受低pH值的、有耐溫的、有適合堿性樣品的等等。

　　一、物理性質(zhì)：

　　1、柱長，內(nèi)徑，如250*4.6mm。一般柱長在2—250mm，柱越長，分離度越，但柱壓更，分離所需時間更長；但分離度與理論塔板數(shù)的平方根成正比，所以一昧增加柱長并不是*的分離手段，一般情況下，150mm、5um的填料可以提供足夠的塔板數(shù)。

　　2、粒徑，影響色譜分離度。粒徑越小，分離越快，柱效越，但柱壓力越，柱容易被污染，導致柱壽命降低。常見分析柱通常使用5um填料，復雜的多組分樣品分離一般使用3.5um粒徑，更大內(nèi)徑的制備色譜柱通常使用更大的粒徑。

　　3、孔徑，60A，100A，120A，300A等?？讖叫?，則含孔率，比表面積大，載碳量；色譜柱填料孔徑大小需和分子大小相匹配，分子自由進出填料孔并與孔內(nèi)表面的鍵合相進行分離分配，通常要求孔徑直徑是分子直徑的3倍以上，一般小分子使用80—120A，大分子使用300A。

　　4、顆粒形狀，一般有球形和不規(guī)則形，當使用黏度較大的流動相時，球形顆?？梢越档椭鶋?，延長色譜柱壽命。

　　二、化學性質(zhì)：

　　1、硅膠基質(zhì)：通用的基質(zhì)，度大，化學修飾容易，但使用的pH值范圍有限(一般為2—8，修飾的可以達到1—12)。

　　2、聚合物基質(zhì)：多為聚苯乙烯—二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸脂，化學穩(wěn)定，應用pH范圍寬，具有更的疏水性，對蛋白質(zhì)等樣品分離效果較好；但度較小，有機溶劑可能導致聚合物溶脹而受損，批次重復性較差，商品化色譜柱不多，一般價格較貴。

　　3、載碳量：基質(zhì)表面鍵合相的比例，載碳量，則保留增加，適合分析非性化合物。

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