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            上海達(dá)為科生物科技有限公司
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            吉姆薩染色實驗

            時間:2022/4/23閱讀:1350
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            吉姆薩染液由天青,伊紅組成。染色原理和結(jié)果與瑞特染色法基本相同。但本法對細(xì)胞核和寄生蟲著色較好,結(jié)構(gòu)顯示更清晰,而胞質(zhì)和中性顆粒則著色較差。


            基本方案


            實驗材料 


            原位雜交玻片


            試劑、試劑盒


            吉姆薩染色液磷酸鈉緩沖液乙醇二甲苯


            儀器、耗材


            染色盤培養(yǎng)箱濾紙


            實驗步驟


            1.  將顯影的玻片置于玻片架上,浸入盛有水的染色盤中。

             

            11個盤:pH6.8 10 mmol/l 磷酸鈉緩沖液,所配的25倍稀釋的吉姆薩染液。

             

            23個盤:水。

             

            3)脫水系列溶液:

             

            3個盤:分別盛50%、70%95%乙醇。

             

            2個盤:盛有100%乙醇。

             

            3個盤:盛有二甲苯。

             

            3.  25倍稀釋的吉姆薩染液中染玻片20 s(依染色時間決定染色的強弱),將玻片在水中浸泡3次,每次2 min

             

            4.  連續(xù)用乙醇脫水系列溶液處理,每盤中浸泡2 min,將玻片移至二甲苯盤中,毎次浸泡2 min,共3次。


            5.  在通風(fēng)櫥中,按如下操作壓片固定:用一平頭鑷(拿在左手),從二甲苯中取出一塊玻片,夾住磨面端置水平。加4Permount 的于另一端(切片所處位置),左手拿一干凈的蓋玻片,很緩慢地放在載玻片上(在加壓片固定介質(zhì)和蓋玻片前,勿使玻片變干,因微小氣泡會造成人為假象)。

             

            6.  3MM 濾紙,沿蓋玻片邊緣,小心吸去多余固片介質(zhì)/二甲苯,并擦拭載玻片背面(勿擦拭蓋玻片)。

             

            7.  將玻片平放于一硬紙盒盤上,置42℃溫孵箱2天使之凝固。

             

            8.  以剃須刀片小心刮去載玻片背面殘留膠乳,染料及固片介質(zhì)。用鏡頭紙或普通棉紙擦去塵埃。放入玻片盒,必要時,載玻片上再注明標(biāo)簽。

             

            9.  顯微鏡觀察玻片,觀察時可依信號強弱,調(diào)節(jié)光亮。


            注意事項


            1.  勿將玻片直立存放于玻片中,因此時固片介質(zhì)尚未凝結(jié)。

            來源:丁香通


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