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            上海達為科生物科技有限公司
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            上海原代細胞分離實驗

            參   考   價: 1000

            訂  貨  量: ≥1  件

            具體成交價以合同協(xié)議為準

            產(chǎn)品型號

            品       牌其他品牌

            廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

            所  在  地上海市

            更新時間:2023-06-29 12:08:01瀏覽次數(shù):1419次

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            上海原代細胞分離實驗是達為科生物的基礎服務項目之一,由細胞平臺經(jīng)驗豐富的實驗人員操作完成。

            人或動物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細胞結(jié)合緊密,不利于各個細胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖,即使采用
            1mm3的組織塊,也只有少量處于周邊的細胞可能生存和生長,若需獲取大量細胞,必須將現(xiàn)有的組織塊
            充分散開,使細胞解離出來,常采用的方法如下:

             

            一、懸浮細胞的分離方法
            組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘,
            若懸液量大,可適當延長離心時間,但速度不能太高,延時也不能太長,以避免擠壓或機械損傷細胞,離
            心沉淀用無鈣、鎂PBS洗兩次,用培養(yǎng)基洗一次后, 調(diào)整適當細胞濃度后再分瓶培養(yǎng),若選用懸液中某些
            細胞,常采用離心后的細胞分層液,因為,經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層,
            這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。

            二、實體組織材料的分離方法
            對于實體組織材料,由于細胞間結(jié)合緊密,為了使組織中的細胞充分分散,形成細胞懸液,可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。
            (一)機械分散法
            所取材料若纖維成分很少,如腦組織,部分胚胎組織可采用剪刀剪切、用吸管吹打分散組織細胞或?qū)⒁殉浞旨羲榉稚⒌慕M織放在注射器內(nèi)(用九號針),使細胞通過針頭壓出,或在不銹鋼紗網(wǎng)內(nèi)用鈍物壓擠(常用注射器鈍端)使細胞從網(wǎng)孔中壓擠出。此法分離細胞雖然簡便、快速,但對組織機械損傷大,而且細胞分散效果差。此法僅適用于處理纖維成分少的軟組織。
            (二)消化分離法
            組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀),應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的
            橋連結(jié)構(gòu)松動,使團塊膨松,由塊狀變成絮狀,此時再采用機械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩,使細胞團塊得以較充分的分散,制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液,接種培養(yǎng)后,細胞容易貼壁生長。

             

             

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