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細胞周期檢測 實驗原理
細胞周期( Cell Cycle )是指細胞從一次分裂完成開始到下一次分裂結(jié)束所經(jīng)歷的全過程, 細胞的遺傳物質(zhì)復(fù)制并均等地分配給兩個子細胞。細胞周期分為間期與分裂期兩個階段。間期又分為三期:即DNA合成前期(G1期)、DNA合成期(S期)與DNA合成后期(G2期)。某些細胞在分裂結(jié)束后暫時離開細胞周期,停止細胞分裂,執(zhí)行一定生物學(xué)功能( G0期)。
流式細胞儀PI染色法檢測細胞周期的原理:由于細胞周期各時相的DNA含量不同,通常正常細胞的G1/ G0期具有二倍體細胞的DNA含量(2N),而G2/ M期具有四倍體細胞的DNA含量(4N),而S期的DNA含量介于二倍體和四倍體之間。PI可以與DNA結(jié)合,其熒光強度直接反映了細胞內(nèi)DNA含量。因此通過流式細胞儀PI染色法對細胞內(nèi)DNA含量進行檢測時,可以將細胞周期各時相區(qū)分為G1/G0期,S期和G2/M期,獲得的流式直方圖對應(yīng)的各細胞周期可通過特殊軟件計算各時相的細胞百分率。
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