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            上海達為科生物科技有限公司
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            細胞劃痕檢測
            • 細胞劃痕檢測

            貨物所在地:上海上海市

            更新時間:2024-11-02 21:00:07

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            細胞劃痕檢測(wound healing)法是簡捷測定細胞遷移運動和修復(fù)能力的方法,類似體外傷口愈合模型。

            一、實驗原理
            細胞劃痕(wound healing)法是簡捷測定細胞遷移運動和修復(fù)能力的方法,類似體外傷口愈合模型,在體外培養(yǎng)皿或平板培養(yǎng)的單層貼壁細胞上,用微量槍頭或其它硬物在細胞生長的*區(qū)域劃線,去除*部分的細胞,然后繼續(xù)培養(yǎng)細胞至實驗設(shè)定的時間,取出細胞培養(yǎng)板,觀察周邊細胞的生長遷移能力,實驗通常需設(shè)定正常對照組和實驗組,實驗組是加了某種處理因素或藥物、外源性基因等的組別,通過不同分組之間的細胞對于劃痕區(qū)修復(fù)能力的不同,可以判斷各組細胞的遷移與修復(fù)能力。
            二、實驗步驟
            1、 所有要滅菌,直尺和marker筆在操作前紫外照射30min. .
            2、先用marker筆在6孔板背后,用直尺比著,大約每隔0.5-1cm一道,橫穿過孔,每孔至少穿過5           條線。

            3、在空中加入約5X105個細胞(具體數(shù)量因細胞不同而不同,掌握為過夜能鋪滿),37C培養(yǎng)箱培              養(yǎng)。

            4、第二天用10μ1槍頭比著直尺,與標記線垂直的方向劃兩條平行線,槍頭要垂直,不能傾斜。
            5、用PBS洗細胞3次,去除劃下的細胞,加入無血清培養(yǎng)基。
            6、放入37°C 5% CO2培養(yǎng)箱,按0、6、12、24h倒置顯微鏡觀察,拍照。

             

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