狠狠色丁香久久综合婷婷亚洲成人福利在线-欧美日韩在线观看免费-国产99久久久久久免费看-国产欧美在线一区二区三区-欧美精品一区二区三区免费观看-国内精品99亚洲免费高清

大鼠缺血/再灌注動(dòng)物模型建立的方法如下：

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 SD雄性大鼠，體重250～300g，清潔級。

分籠飼養(yǎng)(室溫20～23℃，濕度60％～70％)，明暗光照12h：12h，適應(yīng)性飼養(yǎng)1～2d，并按實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用的3R原則給予人道關(guān)懷。術(shù)前12h禁食，自由飲水。

腔內(nèi)注射麻醉(10ml/kg)，注射器針頭從腹部向頭方向刺入腹腔，回抽針芯阻力較大、無回血、無胃腸道內(nèi)容物時(shí)，緩慢推注。約10min后大鼠逐漸癱軟，反應(yīng)淡漠，用手牽拉鼠尾無明顯反抗時(shí)置仰臥位，固定上頜中切牙和四肢。實(shí)驗(yàn)過程中維持大鼠肛溫在37℃左右，直到恢復(fù)活動(dòng)。

手術(shù)按外科無菌原則操作。①備皮，碘伏消毒皮膚。②于正中線旁開約5mm處，行頸部右側(cè)縱行切口，剪開淺筋膜，暴露右側(cè)胸鎖乳突肌，在胸鎖乳突肌與頸前肌群之間向深部鈍性分離，玻璃分針游離頸總動(dòng)脈(CCA)和迷走神經(jīng)，直至 CCA分叉處。鈍性分離向內(nèi)行走的頸外動(dòng)脈(ECA)及向外后行走的頸內(nèi)動(dòng)脈(ICA)。③分別在CCA、ECA、ICA下方穿線，結(jié)扎CCA近心端、頸外動(dòng)脈近分叉部。④在CCA上距其末端約5.0mm處剪一小口，將線栓沿ICA方向連續(xù)輕柔推進(jìn)，插入(18.0±0.5)mm時(shí)遇到輕微阻力即止，然后于ICA近心端結(jié)扎該動(dòng)脈，全層縫合切口，并留置長約3cm的尼龍線于體外，碘伏消毒手術(shù)區(qū)。缺血1h后拔出阻塞線約10min實(shí)現(xiàn)再灌注。假手術(shù)組(Sham組)：插線深度小于10mm，其余處理不變。

動(dòng)物醒后約1h，即出現(xiàn)神經(jīng)功能缺損情況，并借此判定手術(shù)成功性。TTC染色可檢測手術(shù)成功的動(dòng)物出現(xiàn)腦梗死灶。常規(guī)組織切片染色可見腦缺血區(qū)神經(jīng)元、膠質(zhì)細(xì)胞、血管及神經(jīng)氈等損傷，以及星形膠質(zhì)細(xì)胞增生、活化，炎細(xì)胞浸潤等病理變化。