液相色譜儀的分離系統(tǒng)由色譜柱、色譜柱的連接部件、柱恒溫裝置和固定相等組成。
一、色譜柱:
液相色譜儀的色譜柱一般用內(nèi)部拋光的不銹鋼制成,柱內(nèi)徑為1~4mm,柱長(zhǎng)為10~50cm,柱形多為直形,內(nèi)部充滿微粒固定相。近年來(lái),由于高性能填充劑的細(xì)?;?,3~5um微粒填料的使用,趨向柱內(nèi)徑為0.8~1.5mm,柱長(zhǎng)為3~5cm,柱效為10000理論塔板數(shù)/m,所需流動(dòng)相少,并降低了柱壓要求。
二、色譜柱的連接部件:
液相色譜儀的色譜柱兩端裝有燒結(jié)不銹鋼過(guò)濾片或多孔聚四氟乙烯過(guò)濾片,阻止填料倒出或進(jìn)入檢測(cè)器,防止進(jìn)樣針頭插入固定相。
三、柱恒溫裝置:
低溫能提高分離選擇性。
適當(dāng)升高溫度有利于降低溶劑粘度,提高分離速度,降低柱壓力和改善選擇性。
常用柱溫為室溫~65℃。
四、固定相:
1、載體:
?。?)表面多孔型載體:由直徑為30~40um的實(shí)心玻璃球和厚度為1~2um的多孔性外層組成。
?。?)全多孔型載體:由硅膠和硅藻土等材料制成的直徑為30~50um的多孔型顆粒。
(3)全多孔型微粒載體:由納米級(jí)的硅膠微粒堆積而成,又稱堆積硅珠。載體粒度為5~10um,由于顆粒小,所以柱效高,是目前使用zui廣泛的一種載體。
2、固定液:
采用化學(xué)鍵合固定相。
3、柱填充技術(shù):
?。?)干法填充:適合直徑大于20um的填料。
?。?)濕法填充:高壓勻漿填充。
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