分光光度計作為實驗室中常用的儀器之一,從低端到,五花八門,大家在選擇時可能有些無所適從。這里提幾個題目,可能有助于你理清思路。請記住一點,從實驗室的需要出發(fā),才能挑選出合適的儀器。
你們實驗室的常規(guī)應(yīng)用有哪些?未來會增加或改變嗎?
你需要丈量的樣品體積范圍?假如它變化很大,你需要著重考慮分光光度計的樣品量和靈活性。
你是否需要同時丈量多個樣品?
你需要什么樣的靈敏度?對于低濃度樣品,3-5 nm的帶寬比窄帶寬(1 nm)儀器的一致性更好。
有多少人會共用這一臺分光光度計?假如多人共用,預(yù)設(shè)程序可能會比較方便。
分光光度計的波長是選購時要考慮的重要因素之一。在生物學(xué)實驗中,一臺覆蓋紫外光和可見光的分光光度計是*的。這7款分光光度計都采用氙燈,覆蓋了200-780 nm的紫外/可見光波長,其中Vision和NanoVue的波長更是達(dá)到1100 nm,適合一些近紅外研究。
分光光度計的帶寬(bandwidth)很大程度上依靠于單色儀的狹縫的寬度。一種嚴(yán)格帶寬使得儀器能對復(fù)雜的混合物進(jìn)行高分辨率的吸光丈量。對于定量分析而言,3 - 5 nm比較合適??勺兊膯紊珒x的狹縫寬度能使一臺分光光度計滿足多種實驗需要,當(dāng)然,價格也更高。
在檢測器方面,CCD陣列更為普及。它具有非常高的量子效率、噪聲比光電二極管陣列低100倍,不僅光利用率得到改善,信噪比也得以進(jìn)步。另外,CCD 陣列系統(tǒng)采用模塊化處理,使儀器在穩(wěn)定性方面更優(yōu)于如光電倍增管(PMTs)等單點真空管檢測器。
樣品量也是重要的考量因素。以前的比色皿,動輒50 ul,對于珍貴樣品來說那可真是大出血。因此現(xiàn)在面向分子生物學(xué)的分光光度計都趨向于微量化了(揮發(fā)性樣品不宜)。這幾款分光光度計中,NanoDrop、BioSpec-nano、SMA4000和NanoVue都無需比色皿,將樣品滴在特殊的表面上即可丈量,所需的樣品量在2 ul或以下,NanoDrop和NanoVue的低樣品量只有0.5 ul,這下測濃度時不專心痛了吧。這種方法檢測范圍超寬,無需對樣品進(jìn)行稀釋。稀釋樣品不僅耽誤時間,在正確性上也是大打折扣。AlphaSpec是在特制的吸頭中丈量,樣品量也為2 ul。特制的一次性吸頭確保檢測后樣品可以回收,連一點一滴都盡不浪費。Vision可配合不同的比色皿,樣品量在5 ul到2 ml之間。
你們實驗室的常規(guī)應(yīng)用有哪些?未來會增加或改變嗎?
你需要丈量的樣品體積范圍?假如它變化很大,你需要著重考慮分光光度計的樣品量和靈活性。
你是否需要同時丈量多個樣品?
你需要什么樣的靈敏度?對于低濃度樣品,3-5 nm的帶寬比窄帶寬(1 nm)儀器的一致性更好。
有多少人會共用這一臺分光光度計?假如多人共用,預(yù)設(shè)程序可能會比較方便。
分光光度計的波長是選購時要考慮的重要因素之一。在生物學(xué)實驗中,一臺覆蓋紫外光和可見光的分光光度計是*的。這7款分光光度計都采用氙燈,覆蓋了200-780 nm的紫外/可見光波長,其中Vision和NanoVue的波長更是達(dá)到1100 nm,適合一些近紅外研究。
分光光度計的帶寬(bandwidth)很大程度上依靠于單色儀的狹縫的寬度。一種嚴(yán)格帶寬使得儀器能對復(fù)雜的混合物進(jìn)行高分辨率的吸光丈量。對于定量分析而言,3 - 5 nm比較合適??勺兊膯紊珒x的狹縫寬度能使一臺分光光度計滿足多種實驗需要,當(dāng)然,價格也更高。
在檢測器方面,CCD陣列更為普及。它具有非常高的量子效率、噪聲比光電二極管陣列低100倍,不僅光利用率得到改善,信噪比也得以進(jìn)步。另外,CCD 陣列系統(tǒng)采用模塊化處理,使儀器在穩(wěn)定性方面更優(yōu)于如光電倍增管(PMTs)等單點真空管檢測器。
樣品量也是重要的考量因素。以前的比色皿,動輒50 ul,對于珍貴樣品來說那可真是大出血。因此現(xiàn)在面向分子生物學(xué)的分光光度計都趨向于微量化了(揮發(fā)性樣品不宜)。這幾款分光光度計中,NanoDrop、BioSpec-nano、SMA4000和NanoVue都無需比色皿,將樣品滴在特殊的表面上即可丈量,所需的樣品量在2 ul或以下,NanoDrop和NanoVue的低樣品量只有0.5 ul,這下測濃度時不專心痛了吧。這種方法檢測范圍超寬,無需對樣品進(jìn)行稀釋。稀釋樣品不僅耽誤時間,在正確性上也是大打折扣。AlphaSpec是在特制的吸頭中丈量,樣品量也為2 ul。特制的一次性吸頭確保檢測后樣品可以回收,連一點一滴都盡不浪費。Vision可配合不同的比色皿,樣品量在5 ul到2 ml之間。
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