日常工作中,經(jīng)常會用到純水,比如:凍干質控品的復溶,濃縮清洗液的稀釋,試劑的配制,儀器管路的沖洗等,純水每天都在大量參與、影響到我們的檢驗工作,但我們大部分人對純水的了解僅停留在“去離子水”上,對其制備、分級、使用以及對實驗的影響理解的并不充足。
在一些出現(xiàn)異常檢驗結果、定標、質控不好,檢查儀器、試劑、質控品后仍沒能解決時,需要考慮水的影響,很可能是水質污染進而污染分析系統(tǒng)導致上述問題,隨著檢驗技術不斷進步,標本和試劑消耗量越來越少,只需要幾十甚至幾微升,儀器內部管路設計也越來越精密,使得分析過程中水的影響所占比重越來越大。而檢驗科任務繁重,標本量大,對儀器保養(yǎng)維護通常不能做到盡善盡美,從而水不斷影響檢驗工作。
我國規(guī)定實驗用水分三級。一級水用于有嚴格要求、需要zui小程度干擾的分析實驗,包括對顆粒有要求的實驗。二級水用于常規(guī)檢測。三級水常用用于玻璃器皿的預洗。臨床檢驗科使用的是二級純水,由純水機以離子交換方式制得。
表1. 三級水標準
I級 | II級 | III級 | |
zui低電阻率(MΩ .cm 25℃) | 10 | 1 | 0.1 |
微生物數(shù)量(CFU/ml) | 10 | 1000 | - |
硅酸鹽zui大含量(mg/L) | 0.05 | 0.1 | 1 |
PH | - | - | 5.0-8.0 |
顆粒物 | 0.22μm filter | - | - |
有機物 | 活性炭,蒸餾,反滲透 | - | - |
注:“-“為未做規(guī)定
純水機上zui常見到的信息是電阻率,是通過檢測正負兩個電極間純水的微電流強度,來推算純水中的總離子強度,常規(guī)臨床實驗室大于1便可達標。純水水質需定期檢測,檢測頻度及內容根據(jù)實驗室的原水狀況及需要而不同,實驗室水質檢測至少應包括電阻率、微生物培養(yǎng)及硅酸鹽,其他指標可實驗室自行決定,同時建議水質檢測記錄作為質控記錄的一部分共同存檔備查。
水質量不合格也就意味著純水系統(tǒng)水純化的失敗,可能出現(xiàn)在原水預處理過程、三級純水的儲存和離子交換過程中的任何一步。無論哪一步失敗,其雜質來源無外乎自來水和純水機水通道的污染物,主要有:
1. 電解質:zui直接的影響就是對血清(漿)中同種離子測定結果的升高,如對Mg2+,Ca2+,F(xiàn)e3+,Cu2+,Zn2+等的測定,同時也對這些項目的定標產(chǎn)生影響.由于很多金屬離子都是酶的輔因子,因此當金屬離子含量高時往往影響酶活性的檢測(如Mg2+是多種磷酸化激酶的激活劑,水中含量超標時會導致這些酶活性測定值的升高;而許多重金屬離子則對酶有抑制作用,導致酶活性下降)。很多陰離子也作為酶的輔因子存在,對酶活性測定產(chǎn)生影響(如Cl-對α-淀粉酶就有激活作用)。電解質含量高的水更容易形成結晶和導致蛋白等有機物變性附著于管道系統(tǒng),從而使得生化分析儀管道系統(tǒng)更易堵塞,zui終造成測定失真或失??;同時,在使用其對反應杯進行清洗時也很難清洗,會加速反應杯的老化和損壞。
2. 有機物:有機物質的影響主要在于對類似物質測定時導致類似物質測定結果的升高。同時,有機物含量升高也會加速管道系統(tǒng)和反應杯的清洗困難及老化。
3. 顆粒物:顆粒物一般很難通過純水系統(tǒng)進入生化分析儀管道和反應系統(tǒng),其來源一般都是三級純水或一級純水的儲水箱發(fā)生二次污染,但是一旦進入除了會導致吸光度升高外,還很容易堵塞管道和損壞反應杯。
4. 微生物:微生物的去除主要依賴原水的預處理,有些純水系統(tǒng)還在一級純水或超純水處加裝紫外殺菌或者微濾、超濾等裝置,迸一步除去水中殘余的細菌、微粒、熱源等。但一旦預處理失敗或純水儲存箱被二次污染,微生物及其產(chǎn)物就能進入生化分析儀管道系統(tǒng)和反應系統(tǒng),可能出現(xiàn)的情況有兩種:①微生物在管道及反應系統(tǒng)孽生,導致管道堵塞,同時令吸光度和杯空白升高;②微生物產(chǎn)生特定的酶對生化分析儀酶測定產(chǎn)生影響,具體產(chǎn)生什么影響取決于污染菌的類型。
5. 溶解氣體:如CO2,Cl2,H2S等溶解增多導致水pH值的下降,也對pH值依賴性較強的生化項目測定產(chǎn)生影響;某些氣體如Cl2增多,因其自身氧化性較強,會對與氧化還原反應相關的生化測定項目產(chǎn)生影響,如對基于340nm處NADH和NADPH有吸收峰而建立的ALT,AST,BUN等的測定方法,會導測定值的升高。
純水的分裝與儲存也很重要。制備好的純水通常貯存在一較大容器內,由于空氣中村在懸浮顆粒、有機物、微生物等各種污染物,當空氣從蓋子縫隙進入會對水質造成影響,因此不能將水廠時間貯存,當容器中的水取出放入一個二級容器中(比如燒瓶)中使用時,二級容器中的水必須每天更換,未用完的水不能倒回原容器。此外容器應選用能防止化學或微生物污染的材質。
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