ELISA試劑盒假如依照以上的過程用于ELISA檢查試劑盒檢查的話,那么不管采購的國產(chǎn)ELISA試劑盒仍是進(jìn)口ELISA試劑盒的話,那么檢查成果的準(zhǔn)確率都不低的。
面對(duì)市場(chǎng)上品種不斷增加的ELISA試劑盒,人elisa試劑盒、小鼠elisa試劑盒、豬elisa試劑盒、羊ELISA試劑盒等,再挑選的時(shí)分咱們就有些目不暇接了。盡管每個(gè)ELISA試劑盒價(jià)格都不貴,可是假如運(yùn)用不恰當(dāng)?shù)脑挘纬蓹z查成果出差錯(cuò)仍是不好的。所以在運(yùn)用ELISA檢查試劑盒做檢查的時(shí)分,過程的準(zhǔn)確性真的是適當(dāng)重要的。以下先介紹一種簡(jiǎn)略的—間接法:
1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃;
2.次日洗刷3次;
3.加一定稀釋的待檢樣品(不知道抗體)0.1ml于上述已包被之反響孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗刷;
4.(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對(duì)照)于反響孔中,參加新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml;
5.37℃孵育35-60分鐘,洗刷;
6.zui終一遍用DDW洗刷。
7.加底物液顯色:于各反響孔中參加暫時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
8.停止反響:于各反響孔中參加2M硫酸0.05ml。
9.成果斷定:可于白色布景上,直接用肉眼觀察成果:反響孔內(nèi)色彩越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反響為無色或極淺,根據(jù)所呈色彩的深淺,以“+"、“-"號(hào)表示。
ELISA試劑盒也可測(cè)OD值:在ELISA檢查儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)則的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽性。
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