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            液相色譜柱的維護(hù)

            來源:南京皓而普分析設(shè)備有限公司(愛爾蘭AGC南京辦事處)   2016年11月28日 08:53  
              1.色譜柱的平衡:
              反相色譜柱由工廠測試后是保存在乙腈/水中的。新柱應(yīng)先使用10-20倍柱體積的甲醇或乙腈沖洗色譜柱。請一定確保您分析樣品所使用的流動相和乙腈/水互溶。每天用足夠的時(shí)間以流動相來平衡色譜柱,您就會在處理問題方面獲得zui大的"補(bǔ)償",而且您的色譜柱的壽命也會變得更長!
              操作步驟:
              a.平衡開始時(shí)將流速緩慢地提高,用流動相平衡色譜柱直到獲得穩(wěn)定的基線(緩沖鹽或離子對試劑流速如果較低,則需要較長的時(shí)間來平衡)
              b. 如果使用的流動相中含有緩沖鹽,應(yīng)注意用純水"過渡"即每天分析開始前必須先用純水沖洗30分鐘以上再用緩沖鹽流動相平衡;分析結(jié)束后必須先用純水沖洗30分鐘以上除去緩沖鹽之后再用甲醇沖洗30分鐘保護(hù)柱子。液相色譜柱的維護(hù)。
              2 色譜柱的再生:
              長期使用的色譜柱,往往柱效會下降(柱子的理論塔板數(shù)減低)??梢詫ιV柱進(jìn)行再生,在有條件的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)使用一個(gè)廉價(jià)的泵進(jìn)行柱子的再生。建議用來沖洗柱子的溶劑體積色譜柱尺寸 柱體積 所用溶劑的體積 125-4mm 1.6ml 30ml 250-4 mm 3.2ml 60ml 250-10mm 20ml 400ml
              選擇再生方法:極性固定相(如Si,NH2*,DIOL基色譜填料)的再生:正庚烷→氯仿→乙酸乙酯→丙酮→乙醇→水非極性固定相(如反相色譜填料RP-18,RP-8,CN等)的再生:水→乙腈→氯仿(或異丙醇)→乙腈→水
              注意:
              a. 在對NH2改性的色譜柱進(jìn)行再生時(shí),由于NH2可能以銨根離子的形式存在,因此應(yīng)該在水洗后用0.1M的氨水沖洗,然后再用水沖洗至堿溶液*流出。
              b.0.05M稀硫酸可以用來清洗已污染的色譜柱,如果簡單的用有機(jī)溶劑/水的處理不能夠*洗去硅膠表面吸附的雜質(zhì),在水洗后加用0.05M稀硫酸沖洗非常有效。
              3. 色譜柱的維護(hù):
              a.使用預(yù)柱保護(hù)分析柱(硅膠在極性流動相/離子性流動相中有一定的溶解度)
              b.大多數(shù)反相色譜柱的pH穩(wěn)定范圍是2-7.5,盡量不超過該色譜柱的pH范圍
              c.避免流動相組成及極性的劇烈變化
              d.流動相使用前必須經(jīng)脫氣和過濾處理
              e.如果使用極性或離子性的緩沖溶液作流動相,應(yīng)在實(shí)驗(yàn)完畢柱子沖洗干凈,并保存于甲醇或乙腈中f.氯化物的溶劑對其有一定的腐蝕性,故使用時(shí)要注意,柱及連接管內(nèi)不能長時(shí)間存留此類溶劑,以避免腐蝕。

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