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填充劑的要求
zui常用的色譜柱填充劑為化學(xué)鍵合硅膠。反相色譜系統(tǒng)使用非極性填充劑，以十八烷基硅烷鍵合硅膠zui為常用，辛基硅烷鍵合硅膠和其他類(lèi)型的硅烷鍵合硅膠（如氰基鍵合硅烷和氨基鍵合硅烷等）也有使用。正相色譜系統(tǒng)使用極性填充劑，常用的填充劑有硅膠等。離子交換色譜系統(tǒng)使用離子交換填充劑；分子排阻色譜系統(tǒng)使用凝膠或高分子多孔微球等填充劑；對(duì)映異構(gòu)體的分離通常使用手性填充劑。
填充劑的性能（如載體的形狀、粒徑、孔徑、表面積、鍵合基團(tuán)的表面覆蓋度、含碳量和鍵合類(lèi)型等）以及色譜柱的填充，直接影響供試品的保留行為和分離效果。孔徑在15nm（1nm=10Å）以下的填料適合于分析分子量小于2000 的化合物，分子量大于2000 的化合物則應(yīng)選擇孔徑在30nm 以上的填料。除另有規(guī)定外，分析柱的填充劑粒徑一般在3μm~10μm 之間。粒徑更?。s2μm）的填充劑常用于填裝微徑柱（內(nèi)徑約2mm），使用微徑柱時(shí)，輸液泵的性能、進(jìn)樣體積、檢測(cè)池體積和系統(tǒng)的死體積等必須與之匹配；如有必要，色譜條件也需作適當(dāng)?shù)恼{(diào)整。當(dāng)對(duì)其測(cè)定結(jié)果產(chǎn)生爭(zhēng)議時(shí)，應(yīng)以品種正文規(guī)定的色譜條件的測(cè)定結(jié)果為準(zhǔn)。
溫度的要求
以硅膠為載體的普通鍵合固定相的使用溫度通常不超過(guò)35℃，為改善分離效果可適當(dāng)提高色譜柱的使用溫度，但不能超過(guò)60℃。
流動(dòng)相的要求
流動(dòng)相的pH 值應(yīng)控制在2～8 之間。當(dāng)pH 值大于8 時(shí)，可使載體硅膠溶解；當(dāng)pH 值小于2 時(shí)，與硅膠相連的化學(xué)鍵合相易水解脫落。當(dāng)色譜系統(tǒng)中需使用pH 值大于8 的流動(dòng)相時(shí)，應(yīng)選用耐堿的填充劑，如采用高純硅膠為載體并具有高表面覆蓋度的鍵合硅膠填充劑、包覆聚合物填充劑、有機(jī)-無(wú)機(jī)雜化填充劑或非硅膠填充劑等；當(dāng)需使用pH 值小于2 的流動(dòng)相時(shí)，應(yīng)選用耐酸的填充劑，如具有大體積側(cè)鏈能產(chǎn)生空間位阻保護(hù)作用的二異丙基或二異丁基取代十八烷基硅烷鍵合硅膠填充劑，或有機(jī)-無(wú)機(jī)雜化填充劑等。
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